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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于半定量PCR的问题
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dong849025

木虫 (著名写手)

[交流] 关于半定量PCR的问题

请问大家一个问题，我最近做半定量PCR，目的条带都很清楚，但是内参基因扩出来的效果不好，有时还扩不出来，之前还挺好的，最近就一直不好。大家有没有相关的经验啊。
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1楼 2013-03-23 04:27:45
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
dong849025: 金币+1, 谢谢 我可以按你的方法试试 如果是这个原因 会给你追加金币 2013-03-23 19:14:12
古可ぷ: 金币+1, 谢谢应助 2013-03-25 20:21:23
建议你把内参基因的引物重新稀释一管新的，看是否是引物降解。
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3楼2013-03-23 08:13:15
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czfscf

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
检测下人品有没有被降解！哈哈纯属娱乐
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4楼2013-03-23 08:20:14
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heroyl

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
古可ぷ: 金币+1, 谢谢交流 2013-03-25 20:21:33
个人感觉半定量没有定量靠谱，有调节的话还是做定量吧，基本上现在做半定量的人很少了！
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5楼2013-03-24 09:56:28
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wchuangqi

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
古可ぷ: 金币+1, 感谢交流 2013-03-25 20:21:41
现在好多杂志都不接受半定量结果了，所以还是直接定量吧，除非你是看有或者无的关系。另外我觉得你应该首先跑胶确定一下，你的RNA质量怎么样。
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6楼2013-03-24 15:26:46
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tongyanna

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
古可ぷ: 金币+1, 鼓励交流 2013-03-25 20:21:53
半定量PCR已经不那么精确了，现在人们做的最多的是实时定量
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7楼2013-03-25 19:39:21
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andywang6137

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
上面几位的回复很有价值，可以帮到你。
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9楼2013-03-25 21:49:03
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笋编牌紫薯

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我做了三管的反转录分别是干扰组，空载体对照组，只有空载体组的内参基因扩出来了，目的基因也有条带。干扰组内参基因没有扩出来但目的基因却扩出来了。请教这是怎么回事？表示脸也绿了。。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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10楼2014-04-27 18:37:05
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qiuqiu20122楼
2013-03-23 05:18   回复  
wangkj8楼
2013-03-25 20:18   回复  
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