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[求助]
PCR-DGGE实验中PCR总出现非特异条带,求帮助!
各位大神,用细菌通用引物PRBA338F(341F) and PRUN518R(534R)扩V3可变区,总没法获得单一条带(以前从未遇到),求大神帮忙分析下,谢谢了!
PCR体系50ul:10*EX buffer 5uL; dNTP 4uL;20uM引物各1uL;EX Taq(TaKaRa) 0.6uL(5U/uL);模板1uL。
PCR反应:94度5min;94度1min,55度1min,72度1min,共30个循环;72度延伸10min。
电泳染料是Gel-red,用的0.5*TBE缓冲液,电压110V。
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PCR图.jpg
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DNA2副本.jpg |
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