24小时热门版块排行榜    

查看: 1358  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

478203301

金虫 (小有名气)

[求助] his-tag抗不出来

我们请公司构建的neuritin蛋白,以pcDNA3.1为载体,tag标签在C端,在NCBI上blast序列比对也是正确的,但是用his标签一直抗不出来,也换过几家抗体,都抗不出来,有人遇到过同样的问题吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

引用回帖:
3楼: Originally posted by 478203301 at 2013-04-27 22:59:12
嗯 对 表述有误  应该是  我们请公司构建的neuritin 蛋白,以pcDNA3.1作为载体,his标签在C端,构建回来后序列比对也是正确的,但是用his抗体一直抗不出来,换过几家公司的抗体,都没有抗出来,希望高手予以指点   ...

我们做WB,一般说压蛋白,杂蛋白,不说抗蛋白哈,1楼说你表述山寨,我想他应该指的是这个
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2013-04-28 02:31:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

panyuzhu

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

2楼2013-04-27 20:59:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

478203301

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by panyuzhu at 2013-04-27 20:59:00
“]his-tag抗不出来 ”“his标签一直抗不出来”
好山寨的表述啊。

嗯 对 表述有误  应该是  我们请公司构建的neuritin 蛋白,以pcDNA3.1作为载体,his标签在C端,构建回来后序列比对也是正确的,但是用his抗体一直抗不出来,换过几家公司的抗体,都没有抗出来,希望高手予以指点  这样行吗?  阁下有高见吗?
3楼2013-04-27 22:59:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。同样期待你更详细的应助指导。 2013-04-28 11:04:06
你首先需要确定的是你的蛋白是否表达,3.1用于哺乳动物细胞(CHO居多)。那么我建议对细胞内产物和培养基soup一起进行WB,且在WB中加入内参保重,整个WB过程没有问题。
好运
5楼2013-04-28 03:15:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +16 羊腰板 2026-08-21 17/850 2026-08-23 23:02 by tianxiaochun
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 什么时候开奖? +9 CrisMessi 2026-08-18 10/500 2026-08-23 12:03 by 丶昵称占用
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 炎黄贵胄 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
信息提示
请填处理意见