24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1205  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

478203301

金虫 (小有名气)

[求助] his-tag抗不出来

我们请公司构建的neuritin蛋白,以pcDNA3.1为载体,tag标签在C端,在NCBI上blast序列比对也是正确的,但是用his标签一直抗不出来,也换过几家抗体,都抗不出来,有人遇到过同样的问题吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

478203301

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by panyuzhu at 2013-04-27 20:59:00
“]his-tag抗不出来 ”“his标签一直抗不出来”
好山寨的表述啊。

嗯 对 表述有误  应该是  我们请公司构建的neuritin 蛋白,以pcDNA3.1作为载体,his标签在C端,构建回来后序列比对也是正确的,但是用his抗体一直抗不出来,换过几家公司的抗体,都没有抗出来,希望高手予以指点  这样行吗?  阁下有高见吗?
3楼2013-04-27 22:59:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

panyuzhu

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

2楼2013-04-27 20:59:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

引用回帖:
3楼: Originally posted by 478203301 at 2013-04-27 22:59:12
嗯 对 表述有误  应该是  我们请公司构建的neuritin 蛋白,以pcDNA3.1作为载体,his标签在C端,构建回来后序列比对也是正确的,但是用his抗体一直抗不出来,换过几家公司的抗体,都没有抗出来,希望高手予以指点   ...

我们做WB,一般说压蛋白,杂蛋白,不说抗蛋白哈,1楼说你表述山寨,我想他应该指的是这个
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2013-04-28 02:31:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。同样期待你更详细的应助指导。 2013-04-28 11:04:06
你首先需要确定的是你的蛋白是否表达,3.1用于哺乳动物细胞(CHO居多)。那么我建议对细胞内产物和培养基soup一起进行WB,且在WB中加入内参保重,整个WB过程没有问题。
好运
5楼2013-04-28 03:15:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] chinese chemical letters英文版投稿求助 130+4 Yishengeryi 2026-03-30 4/200 2026-03-31 19:52 by babero
[考研] 254材料与化工求调剂 +3 翰冬林楠 2026-03-30 4/200 2026-03-31 17:53 by yishunmin
[考研] 考研生物与医药调剂 +6 铁憨憨123425 2026-03-31 6/300 2026-03-31 17:48 by 544594351
[考研] 362求调剂 +9 西南交材料专硕3 2026-03-31 9/450 2026-03-31 16:25 by w虫虫123
[考研] 08工科,295,接受跨专业调剂 +4 lmnlzy 2026-03-31 4/200 2026-03-31 15:25 by 西京学院招办
[考研] 求调剂 +4 图鉴212 2026-03-30 4/200 2026-03-31 10:20 by cal0306
[考研] 一志愿中海洋320化学工程与技术学硕求调剂 +8 披星河 2026-03-30 8/400 2026-03-31 08:53 by lbsjt
[考研] 08工科求调剂286 +5 tgs_001 2026-03-28 5/250 2026-03-31 08:18 by 一只好果子?
[考研] 福建理工大学材料学院先进合金团队招收考研调剂学生 +3 大华金商都 2026-03-30 4/200 2026-03-31 01:04 by 方英俊602
[考研] 322求调剂 +10 宋明欣 2026-03-27 10/500 2026-03-30 18:47 by 544594351
[考研] 284求调剂 +14 junqihahaha 2026-03-26 15/750 2026-03-30 14:12 by 探123
[考研] 求调剂 +4 QiMing7 2026-03-25 5/250 2026-03-29 21:10 by 唐沐儿
[考研] 086000生物与医药调剂 +5 Feisty。 2026-03-28 9/450 2026-03-29 12:02 by longlotian
[考研] 本科双非材料,跨考一志愿华电085801电气,283求调剂,任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
[论文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 Russ_ss 2026-03-25 5/250 2026-03-27 10:49 by 陆小果画大饼
[考研] 调剂求收留 +7 果然有我 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:26 by wxiongid
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 303求调剂 +6 蓝山月 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:47 by 418490947
信息提示
请填处理意见