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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 琼脂糖跑RNA无任何处理 帮我看看 这个图 RNA是不是降解了？
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cao126

铜虫 (正式写手)

[交流] 琼脂糖跑RNA无任何处理 帮我看看 这个图 RNA是不是降解了？

琼脂糖跑RNA无任何处理  帮我看看 这个图 RNA是不是降解了？  200V跑了10分钟  1%的琼脂糖，加5ulRNA。RNA是不是降解了？

IMAG2178.jpg
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1楼 2013-04-22 11:52:44
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天 2013-04-22 18:47:59
amisking: 回帖置顶 2013-04-22 20:36:07
cao126: 金币+5 2013-04-23 17:38:13
不能判断你的RNA是否降解，因为你的胶配的的确不好，胶不好，跑出来的条带就是像这样的，
给你看几张我跑过的RNA图，当然提的好的RNA就是像这样子的
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hectorwu
2楼2013-04-22 17:26:55
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小神-小神

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
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cao126: 金币+1 2013-04-23 17:37:55
cao126: 金币+2 2013-04-23 17:38:01
楼主的胶跟我刚开始跑胶的时候效果一样的……不一定是样品的问题，可能胶没有加热彻底，要彻底澄清才拿出微波炉啊，最好沸腾2次。保险。
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4楼2013-04-23 10:48:32
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普通回帖

蓝慧

木虫 (正式写手)
★ ★
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cao126: 金币+1 2013-04-23 17:38:04
2楼的同学，太厉害了，提的这么好。佩服佩服
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3楼2013-04-22 19:04:17
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吟啸徐行

银虫 (小有名气)
★ ★
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cao126: 金币+1 2013-04-23 17:37:52
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-04-22 17:26:55
不能判断你的RNA是否降解，因为你的胶配的的确不好，胶不好，跑出来的条带就是像这样的，
给你看几张我跑过的RNA图，当然提的好的RNA就是像这样子的



...

二楼的太强大了，我跑过那么多张RNA的电泳图，也没见这样的图，传授下经验啊。
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5楼2013-04-23 15:33:59
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xiedt

金虫 (著名写手)
祝福，祝福，祝福，抢沙发
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6楼2013-04-23 15:53:36
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cao126

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-04-22 17:26:55
不能判断你的RNA是否降解，因为你的胶配的的确不好，胶不好，跑出来的条带就是像这样的，
给你看几张我跑过的RNA图，当然提的好的RNA就是像这样子的



...

恩 谢谢了 你的图 真的很不错 谢谢提醒，以后会注意配胶
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7楼2013-04-23 17:39:24
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zqk0532

铁杆木虫 (小有名气)
★
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2楼提的RNA也降解了
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8楼2013-04-23 19:23:03
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zqk0532

铁杆木虫 (小有名气)
★
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RNA??

RNA.jpg
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9楼2013-04-23 19:29:38
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卷舒_ray

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请教下胶配的怎样算好
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10楼2013-04-26 21:45:07
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hectorwu

新虫 (初入文坛)
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送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-04-22 17:26:55
不能判断你的RNA是否降解，因为你的胶配的的确不好，胶不好，跑出来的条带就是像这样的，
给你看几张我跑过的RNA图，当然提的好的RNA就是像这样子的



...

请问配胶的时候琼脂糖多沸腾一会会不会有不好的影响？您这个染料是怎么加的呢，看起来像是加到样品里面的，可是我们用的花青素感觉和loading buffer混合后会有沉淀，您是用的啥染料呢？
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11楼2014-12-27 14:14:25
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意萧02

木虫 (正式写手)
降解了

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12楼2014-12-27 14:52:43
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by hectorwu at 2014-12-27 14:14:25
请问配胶的时候琼脂糖多沸腾一会会不会有不好的影响？您这个染料是怎么加的呢，看起来像是加到样品里面的，可是我们用的花青素感觉和loading buffer混合后会有沉淀，您是用的啥染料呢？...

RNA loading用DNA的6X loading就行,具体配制方法参考takara的网上的技术资料
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13楼2014-12-28 17:19:59
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原来，是这样

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
电压太高了，居然用200V的电压。。。我跑RNA都是用80多V的电压，RNA制备的时候已经加过RNA酶抑制剂，所以跑胶的时候根本不用处理了，用80-90V电压跑三十分钟的图都可以看到三条带了，而且降解很少。

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14楼2014-12-28 21:04:13
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小苹果102810

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-04-22 17:26:55
不能判断你的RNA是否降解，因为你的胶配的的确不好，胶不好，跑出来的条带就是像这样的，
给你看几张我跑过的RNA图，当然提的好的RNA就是像这样子的



...

太强大了，分享一下方法啊，么么哒！

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15楼2014-12-29 01:01:57
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