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cao126

铜虫 (正式写手)


[交流] 琼脂糖跑RNA无任何处理 帮我看看 这个图 RNA是不是降解了?

琼脂糖跑RNA无任何处理  帮我看看 这个图 RNA是不是降解了?  200V跑了10分钟  1%的琼脂糖,加5ulRNA。RNA是不是降解了?

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天 2013-04-22 18:47:59
amisking: 回帖置顶 2013-04-22 20:36:07
cao126: 金币+5 2013-04-23 17:38:13
不能判断你的RNA是否降解,因为你的胶配的的确不好,胶不好,跑出来的条带就是像这样的,
给你看几张我跑过的RNA图,当然提的好的RNA就是像这样子的



» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2013-04-22 17:26:55
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

小神-小神

木虫 (正式写手)


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cao126: 金币+1 2013-04-23 17:37:55
cao126: 金币+2 2013-04-23 17:38:01
楼主的胶跟我刚开始跑胶的时候效果一样的……不一定是样品的问题,可能胶没有加热彻底,要彻底澄清才拿出微波炉啊,最好沸腾2次。保险。
4楼2013-04-23 10:48:32
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普通回帖

蓝慧

木虫 (正式写手)


★ ★
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cao126: 金币+1 2013-04-23 17:38:04
2楼的同学,太厉害了,提的这么好。佩服佩服
3楼2013-04-22 19:04:17
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吟啸徐行

银虫 (小有名气)


★ ★
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cao126: 金币+1 2013-04-23 17:37:52
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-04-22 17:26:55
不能判断你的RNA是否降解,因为你的胶配的的确不好,胶不好,跑出来的条带就是像这样的,
给你看几张我跑过的RNA图,当然提的好的RNA就是像这样子的



...

二楼的太强大了,我跑过那么多张RNA的电泳图,也没见这样的图,传授下经验啊。
5楼2013-04-23 15:33:59
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xiedt

金虫 (著名写手)


祝福,祝福,祝福,抢沙发
6楼2013-04-23 15:53:36
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cao126

铜虫 (正式写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-04-22 17:26:55
不能判断你的RNA是否降解,因为你的胶配的的确不好,胶不好,跑出来的条带就是像这样的,
给你看几张我跑过的RNA图,当然提的好的RNA就是像这样子的



...

恩 谢谢了 你的图 真的很不错 谢谢提醒,以后会注意配胶
7楼2013-04-23 17:39:24
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zqk0532

铁杆木虫 (小有名气)



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2楼提的RNA也降解了
8楼2013-04-23 19:23:03
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zqk0532

铁杆木虫 (小有名气)



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RNA??

RNA.jpg

9楼2013-04-23 19:29:38
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卷舒_ray

金虫 (小有名气)



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请教下胶配的怎样算好
10楼2013-04-26 21:45:07
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hectorwu

新虫 (初入文坛)



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送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-04-22 17:26:55
不能判断你的RNA是否降解,因为你的胶配的的确不好,胶不好,跑出来的条带就是像这样的,
给你看几张我跑过的RNA图,当然提的好的RNA就是像这样子的



...

请问配胶的时候琼脂糖多沸腾一会会不会有不好的影响?您这个染料是怎么加的呢,看起来像是加到样品里面的,可是我们用的花青素感觉和loading buffer混合后会有沉淀,您是用的啥染料呢?
11楼2014-12-27 14:14:25
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意萧02

木虫 (正式写手)


降解了

[ 发自小木虫客户端 ]
12楼2014-12-27 14:52:43
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引用回帖:
11楼: Originally posted by hectorwu at 2014-12-27 14:14:25
请问配胶的时候琼脂糖多沸腾一会会不会有不好的影响?您这个染料是怎么加的呢,看起来像是加到样品里面的,可是我们用的花青素感觉和loading buffer混合后会有沉淀,您是用的啥染料呢?...

RNA loading用DNA的6X loading就行,具体配制方法参考takara的网上的技术资料
13楼2014-12-28 17:19:59
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原来,是这样

金虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
电压太高了,居然用200V的电压。。。我跑RNA都是用80多V的电压,RNA制备的时候已经加过RNA酶抑制剂,所以跑胶的时候根本不用处理了,用80-90V电压跑三十分钟的图都可以看到三条带了,而且降解很少。

[ 发自小木虫客户端 ]
14楼2014-12-28 21:04:13
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小苹果102810

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-04-22 17:26:55
不能判断你的RNA是否降解,因为你的胶配的的确不好,胶不好,跑出来的条带就是像这样的,
给你看几张我跑过的RNA图,当然提的好的RNA就是像这样子的



...

太强大了,分享一下方法啊,么么哒!

[ 发自小木虫客户端 ]
15楼2014-12-29 01:01:57
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