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巢北

银虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 2414488
注册: 2013-04-12
专业: 微生物资源与分类学

[求助] 求助：为什么Ni柱再生后纯化蛋白无活性~~~

我做了两次纯化，第一次用的是一个旧柱子，上柱后用梯度洗脱液洗脱，检测每个梯度洗下的酶都是有活性的。后来把柱子再生了一下，诱导表达后破碎菌体，将破碎上清检测了一下也是有活性的，但是上柱纯化透析复性之后就没活性了，这样看是柱子再生的问题吗？

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1楼2013-04-22 09:31:52

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renzhiq

木虫 (小有名气)

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专业: 微生物学

【答案】应助回帖

楼主不要担心。
解决的方法很简单，再生后用25%的乙醇冲洗柱子，冲100倍柱体积，再用来纯化就好了
祝实验顺利

5楼2013-05-01 10:29:30

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