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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菌液PCR后关于质粒双酶切的问题
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hemiaonv

铜虫 (初入文坛)

[求助] 菌液PCR后关于质粒双酶切的问题

各位大神：
      本人用Xho1与xbo1分布酶切质粒与目的基因，然后连接转化，经过菌液PCR，电泳验证P出目的条带， 然后用10微升的体系做一个质粒双酶切的验证，但是电泳条带在3000-35oobp间，请问各位这可能原因是？
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1楼 2013-04-15 11:26:22
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lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hemiaonv: 金币+2 2013-04-24 10:06:31
酶切的条带是你质粒本身的条带吧，目的条带没有，有没有做质粒PCR，还有菌液PCR是有很高的假阳性的。。。
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生物化学与分子生物学
2楼2013-04-15 11:58:57
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hua_geduo

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-04-15 16:35:05
hemiaonv: 金币+3 2013-04-24 10:06:14
质粒双酶切一般都要做对照的，一个双酶切体系，两个分别的单酶切和质粒的对照，这样跑胶出来可以看到你到底切开还是没切开
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3楼2013-04-15 12:51:31
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