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momo2111

木虫 (小有名气)

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[求助] RNA定量时A260/A280范围

最近在提取细胞RNA时，最后用75%乙醇洗涤后，加20ulDEPC水溶解，但测出来的A260/A280总是在1.8左右，有时候1.7几，有时候1.82什么的，总是到不了1.9，我看到有人说在水中测定 A260/A280，比值将变低 0.3 左右，那在测的时候也是用DEPC水Blank过的，还会是低0.3吗？我看书上A260/A280值在1.9-2.1是RNA溶解在10 mM Tris/HCl, pH 7.5中的，一直搞不明白用DEPC水溶解的话是否也需要在1.9-2.1之间？请各位前辈帮忙！谢谢！！

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1楼 2013-04-13 23:20:39

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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

MolEPI: 10
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虫号: 1614001
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专业: 生物化学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

做nanodrip的时候严格的说是用溶解样品的溶液blank，但你说的这些不会影响紫外吸收，所以也可以用ddH2O做空白。如果你测的A260/280偏低，说明样品中有蛋白杂质，可能是你提取的时候蛋白没有除干净。

2楼2013-04-14 00:46:03

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