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momo2111

木虫 (小有名气)

[求助] RNA定量时A260/A280范围

最近在提取细胞RNA时,最后用75%乙醇洗涤后,加20ulDEPC水溶解,但测出来的A260/A280总是在1.8左右,有时候1.7几,有时候1.82什么的,总是到不了1.9,我看到有人说在水中测定 A260/A280,比值将变低 0.3 左右,那在测的时候也是用DEPC水Blank过的,还会是低0.3吗?我看书上A260/A280值在1.9-2.1是RNA溶解在10 mM Tris/HCl, pH 7.5中的,一直搞不明白用DEPC水溶解的话是否也需要在1.9-2.1之间?请各位前辈帮忙!谢谢!!
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做nanodrip的时候严格的说是用溶解样品的溶液blank,但你说的这些不会影响紫外吸收,所以也可以用ddH2O做空白。如果你测的A260/280偏低,说明样品中有蛋白杂质,可能是你提取的时候蛋白没有除干净。
2楼2013-04-14 00:46:03
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