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wmjqy

新虫 (初入文坛)

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[交流] OD中 A260/A280值均小于1.8，能逆转录吗？已有4人参与

想请问一下，我测的OD中 A260/A280值均小于1.8，能逆转录吗？是不是蛋白污染吗？怎样确定是DNA污染？？如果是蛋白污染，应该怎样处理呢。还有如果是RNA降解了，A260/A280，是怎样的变化。谢谢各位同学的指教！

[ Last edited by wmjqy on 2012-5-22 at 23:53 ]

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1楼 2012-05-22 23:49:19

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ncaty

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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-23 13:59:56

测定是否蛋白污染不是还要测A230么? A230/A260才能看出是否蛋白污染啊. ( A230/A260,A260/280,分别是蛋白/RNA,RNA/DNA),如果RNA降解,那A260/A280的比值就变小咯.
我们实验室是这样做的,有不妥之处希望大家指出哦~!

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2楼2012-05-23 08:01:51

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longrna

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引用回帖:

2楼: Originally posted by ncaty at 2012-05-23 08:01:51:
测定是否蛋白污染不是还要测A230么? A230/A260才能看出是否蛋白污染啊. ( A230/A260,A260/280,分别是蛋白/RNA,RNA/DNA),如果RNA降解,那A260/A280的比值就变小咯.
我们实验室是这样做的,有不妥之处希望大家指出哦~!

一般来说（注意是“一般”），RNA的260/280应该在1.8-2.1之间，比值偏小（如<1.6）可能有蛋白污染（280一般认为是蛋白的吸收峰）；比值偏大（>2.3）有可能降解了（可能而已，不用担心，一切以电泳或2100检测为准）。
260/230比值一般认为是盐度。即如比值太低(如<1)则很可能里面含有盐，宜在沉淀时用75%乙醇充分悬浮清洗。

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