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wmjqy

新虫 (初入文坛)

[交流] OD中 A260/A280值均小于1.8,能逆转录吗? 已有4人参与

想请问一下,我测的OD中 A260/A280值均小于1.8,能逆转录吗?是不是蛋白污染吗?怎样确定是DNA污染??如果是蛋白污染,应该怎样处理呢。还有如果是RNA降解了,A260/A280,是怎样的变化。谢谢各位同学的指教!

[ Last edited by wmjqy on 2012-5-22 at 23:53 ]
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ncaty

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-23 13:59:56
测定是否蛋白污染不是还要测A230么? A230/A260才能看出是否蛋白污染啊. ( A230/A260,A260/280,分别是蛋白/RNA,RNA/DNA),如果RNA降解,那A260/A280的比值就变小咯.
我们实验室是这样做的,有不妥之处希望大家指出哦~!
2楼2012-05-23 08:01:51
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longrna

新虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-23 14:00:12
引用回帖:
2楼: Originally posted by ncaty at 2012-05-23 08:01:51:
测定是否蛋白污染不是还要测A230么? A230/A260才能看出是否蛋白污染啊. ( A230/A260,A260/280,分别是蛋白/RNA,RNA/DNA),如果RNA降解,那A260/A280的比值就变小咯.
我们实验室是这样做的,有不妥之处希望大家指出哦~!

一般来说(注意是“一般”),RNA的260/280应该在1.8-2.1之间,比值偏小(如<1.6)可能有蛋白污染(280一般认为是蛋白的吸收峰);比值偏大(>2.3)有可能降解了(可能而已,不用担心,一切以电泳或2100检测为准)。
260/230比值一般认为是盐度。即如比值太低(如<1)则很可能里面含有盐,宜在沉淀时用75%乙醇充分悬浮清洗。
伟大航线....
3楼2012-05-23 08:39:45
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wmjqy

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ncaty at 2012-05-23 08:01:51:
测定是否蛋白污染不是还要测A230么? A230/A260才能看出是否蛋白污染啊. ( A230/A260,A260/280,分别是蛋白/RNA,RNA/DNA),如果RNA降解,那A260/A280的比值就变小咯.
我们实验室是这样做的,有不妥之处希望大家指出哦~!

蛋白(氨基酸)的吸收波长为A280. A230是盐类的哦。你是不是弄错了啊???
4楼2012-05-23 21:01:00
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gjs713

至尊木虫 (职业作家)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
也没那么大影响的 可以尝试一下
勤奋、执着、专注,则无坚不破。
5楼2012-05-23 22:25:09
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1992一衣带水

新虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
上次我们的260/280是1.77  逆转录的效果了还不错的
6楼2012-05-25 12:36:27
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