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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于OD值的疑问
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huoweifun

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于OD值的疑问 已有6人参与

请教各位大侠：

     我想设计一个实验来考察几种不同的影响因素对供试液抑菌性的影响，打算在加入供试液一定的时间后，测定菌液的OD值来确定供试液的抑菌性变化规律，再利用这些OD值进行统计处理，最终目的是确定供试液抑菌的最佳工艺。

     现在有几个问题想请教各位：

     1.测定菌液的OD值，我是采用紫外分光光度计测定的，不知是仪器比较旧还是怎样，只能测定吸光度Abs和透光度T%，还有两个选项是R%和Energy，貌似没有能直接测定OD值的选项，那么是测定菌液的吸光度A还是透光度T？A和T怎么和OD值转换呢？有公式么？各位的UV都是能直接读出OD值的吗？

     2.测定菌液的OD值，是否先要采用全波长对实验菌液进行扫描，选取最大吸收峰的波长作为测定波长吗?

     3.我看了一些文献，据报道的测定菌液OD值主要是用来测定菌液浓度的，所以要同时做菌落计数，建立方法的工作曲线；而我的实验是希望能用OD值衡量经各种因素处理后，供试液的抑菌性强弱变化规律的。
       那么想问一下各位：
      （1）OD值既然能表示菌液浓度大小，是否能根据测出的经各因素处理的供试液接触后菌液的OD值，来表示各供试液的抑菌性强弱？

      （2）如果OD值能表示供试液的抑菌性强弱，那么我的实验只需要研究经各种因素处理后的供试液的抑菌性强弱变化规律，是否就可以不用再做菌落计数，也不用做方法的工作曲线，直接用OD值表示（OD值在<0.8的范围内）？

       4.关于测量OD值在微生物学检验中的使用，在哪些教材或专著中有介绍？我想找来详细学习一下，呵呵。

        问题有点多，希望各位大侠能耐心解答和指点。在此先谢谢各位！
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1楼 2012-05-08 16:17:05
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龙儿无双

金虫 (著名写手)
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碰巧看见！给你说一下吧！据你所述你应该是在摇瓶基础上，做抑菌试验；用od值来反映不用因素下的抑菌效果，从理论上是可以的；但在摇瓶基础上你测得OD往往较小，由于你测试时会有误差，这样会出现显著因素跟非显著因素测出的OD值几乎一致，这样的话你将得不到理想的实验结果；建议你找那种能测到OD小数点后4位的仪器，这样会好一些；另外如果找不到，还是OD与数数一起来吧，最后选取两者结果最低的
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8楼2012-05-09 16:16:24
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lt520dc

金虫 (初入文坛)
★
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OD值就是指菌在某一波长下的吸光度
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2楼2012-05-09 07:59:40
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lt520dc

金虫 (初入文坛)
建议你用流式细胞仪
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3楼2012-05-09 08:00:08
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losewayboy

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
OD反应菌浓，lz想做抑菌性，过低的菌浓其OD值相差不大，你需要考虑这个因素，建议流式。不过能拥有流式的单位不多啊
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4楼2012-05-09 08:27:36
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danbomingyue

禁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
5楼2012-05-09 12:30:10
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huoweifun

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by losewayboy at 2012-05-09 08:27:36:
OD反应菌浓，lz想做抑菌性，过低的菌浓其OD值相差不大，你需要考虑这个因素，建议流式。不过能拥有流式的单位不多啊

谢谢你的回复！
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6楼2012-05-09 14:45:42
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huoweifun

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by danbomingyue at 2012-05-09 12:30:10:
LZ
OD值是optical density（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度，检测到的A值即为某一波长下的OD值。
其他的偶不懂！

谢谢你的回复！
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7楼2012-05-09 14:45:49
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依然@叶

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
lz关于你那用全波长扫描的，我觉得完全没必要的，很简单，如果你得到在某个波长下的峰值最大，那请问你是否觉得你那峰值就是菌体的吸收峰？答案是不确定吧？所以这就要求我们在测的时候，通过查文献来确定这菌株的吸收波长是多少，然后选定这个波长进行OD值的测量。
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哀莫大于心死
9楼2012-05-09 16:23:17
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井井-

金虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
4楼: Originally posted by losewayboy at 2012-05-09 08:27:36
OD反应菌浓，lz想做抑菌性，过低的菌浓其OD值相差不大，你需要考虑这个因素，建议流式。不过能拥有流式的单位不多啊

请问流式细胞仪，怎么测定？原理是？谢谢
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10楼2014-11-01 23:06:34
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