24小时热门版块排行榜    

查看: 8501  |  回复: 30
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)


[交流] PCR产物直接双酶切后电泳看不到条带

做完PCR后直接双酶切,然后跑电泳,但是看不到条带,这是什么原因啊?!是因为浓度不够?但是我PCR后跑电泳条带还是挺亮的
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1949stone: MolEPI+1, 向你学习 2013-06-28 12:15:50
可能原因:
1.PCR的电泳的亮带可能是假阳性的非特异性扩增带,不放心就测序确认一下;
2.做酶切时的DNA浓度太低,所以需要用超滤离心浓缩一下看看;
3.PCR的电泳的亮带可能是特异性扩增带,但是从胶中回收目的DNA太少;
4.目的DNA酶切之间已经被降解;
5.酶切目的DNA的限制性内切酶失活,或受到抑制,换别的酶在尝试。
30楼2013-06-28 02:54:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 31 个回答

XOooZzz

银虫 (小有名气)



飘零的叶子(金币+1): 谢谢参与
酶切前取少量pcr产物跑电泳了吗?酶切后点样时确实看着样液沉在胶孔里而不是飘出来了吗?无图无真相。
3楼2013-03-23 10:39:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘零的叶子(金币+1): 谢谢参与
如果你PCR完后跑电泳很亮,直接双酶切怎么可能会没有条带?你该不会是点错了吧?双酶切后对条带大小也没有影响,repeat again
4楼2013-03-23 11:21:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzzaazzzzz

新虫 (初入文坛)



飘零的叶子(金币+1): 谢谢参与
是一直都这样,还是就这次刚做出现的,重复一下,这样的结果是不对的
5楼2013-03-23 16:10:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 XlxB7q11Bc3x 2026-09-01 3/150 2026-09-01 21:52 by Y3OMSsg8u9zj
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 7/350 2026-09-01 15:18 by myrtle
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
信息提示
请填处理意见