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飘零的叶子

新虫 (小有名气)


[交流] PCR产物直接双酶切后电泳看不到条带

做完PCR后直接双酶切,然后跑电泳,但是看不到条带,这是什么原因啊?!是因为浓度不够?但是我PCR后跑电泳条带还是挺亮的
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1949stone: MolEPI+1, 向你学习 2013-06-28 12:15:50
可能原因:
1.PCR的电泳的亮带可能是假阳性的非特异性扩增带,不放心就测序确认一下;
2.做酶切时的DNA浓度太低,所以需要用超滤离心浓缩一下看看;
3.PCR的电泳的亮带可能是特异性扩增带,但是从胶中回收目的DNA太少;
4.目的DNA酶切之间已经被降解;
5.酶切目的DNA的限制性内切酶失活,或受到抑制,换别的酶在尝试。
30楼2013-06-28 02:54:37
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XOooZzz

银虫 (小有名气)



飘零的叶子(金币+1): 谢谢参与
酶切前取少量pcr产物跑电泳了吗?酶切后点样时确实看着样液沉在胶孔里而不是飘出来了吗?无图无真相。
3楼2013-03-23 10:39:08
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飘零的叶子(金币+1): 谢谢参与
如果你PCR完后跑电泳很亮,直接双酶切怎么可能会没有条带?你该不会是点错了吧?双酶切后对条带大小也没有影响,repeat again
4楼2013-03-23 11:21:40
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zzzaazzzzz

新虫 (初入文坛)



飘零的叶子(金币+1): 谢谢参与
是一直都这样,还是就这次刚做出现的,重复一下,这样的结果是不对的
5楼2013-03-23 16:10:03
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