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飘零的叶子

新虫 (小有名气)

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[交流] PCR产物直接双酶切后电泳看不到条带

做完PCR后直接双酶切，然后跑电泳，但是看不到条带，这是什么原因啊？！是因为浓度不够？但是我PCR后跑电泳条带还是挺亮的

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1楼2013-03-23 08:55:22

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dhmdddd

木虫 (正式写手)

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楼主pcr以后是切胶回收的还是过柱回收的？如果是切胶回收的PCR产物亮度如何？如果是过柱回收的，做酶切之前最好跑胶确定下亮度等等，每一步都做好了，才能保证结果。好运

22楼2013-03-24 18:47:21

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dhmdddd

木虫 (正式写手)

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引用回帖:

24楼: Originally posted by 飘零的叶子 at 2013-03-24 18:53:24
是切胶回收的，这是PCR产物电泳图，条带貌似不是特别亮而且还有非特异性条带

chuan.png
...

是不是引物的特异性不够好?目的条带还好吧,应该可以回收到.你切胶回收的PCR产物酶切前重新跑胶验证,看条带是否单一,也看下亮度如何.

27楼2013-03-25 20:04:18

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