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chaoen

木虫 (正式写手)

[求助] 酶蛋白自沉淀问题

由于实验室传统,所有Histag纯化的酶都是迅速冷冻后,在-80条件保存,一般都没有问题,酶当中有250 mM imidazole还有50mM左右磷酸盐和氯化钠。但今天准备测定几个酶的酶活,发现其中一个酶在化冻后,大概几个小时后,开始出现大量沉淀。在常温和冰上化冻都出现相同现象。刚化冻后的酶液检测是有活力的。
请教一下是否有朋友遇到类似问题,是不是因为imidazole的原因使酶变性了?或者还有可能是其他情况?多谢!
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我觉得SDS挺悬乎,得看酶,我的酶遇到5mM的SDS就不行了。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
6楼2013-03-23 00:00:02
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