应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有关蛋白诱导的问题
51/1返回列表
查看: 1844  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zhjzhou

木虫 (著名写手)

[求助] 有关蛋白诱导的问题

各位大侠，有做原核表达，诱导蛋白的吗？我用的载体是PET28a,把自己的目的基因克隆到载体中，测序都正确的，然后做诱导，0.1mM的IPTG诱导28度12h，前面是mark，后面第1通道是对照，没有诱导的，后面依次是2：诱导后；3-5：纯化时，接到的蛋白；6-7：纯化后的蛋白；8：透析后的蛋白；9：flow through。
纯化后的蛋白不是我的目的蛋白啊，我的目的蛋白只有40KD左右，现在这个要100多KD啊，不知道怎么回事？有没有知道的啊？帮忙看看，谢谢！

1.jpg[ Last edited by zhjzhou on 2013-3-21 at 14:17 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-03-21 10:58:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhjzhou

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 无为书生 at 2013-03-21 16:26:01
貌似你的目的蛋白就没有表达，纯化的不是目的蛋白！

是啊，我的目的蛋白没有那么大，纯化的这个不知道是什么
赞一下 回复此楼
4楼2013-03-21 19:16:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

无为书生

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhjzhou: 金币+2, ★有帮助, 是啊，纯化的这个不是我的目的蛋白啊，我的目的蛋白没有那么大，不知道这条是什么 2013-03-21 19:17:47
貌似你的目的蛋白就没有表达，纯化的不是目的蛋白！
赞一下 回复此楼
2楼2013-03-21 16:26:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qianjinyu

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhjzhou: 金币+3, ★有帮助, 上样缓冲液里有巯基乙醇的，那最粗的诱导表达的不是我的目的蛋白啊，比我的目的蛋白大很多，我的目的蛋白只有40多，这个要100多呢，是不是形成的二聚体啊？ 2013-03-21 19:19:38
对一下读码框，看一下东西有没有弄错！如果都没错的话，检查一下上样液里面有没有巯基乙醇，最粗的那个应该是诱导表达条带
赞一下 回复此楼
3楼2013-03-21 19:14:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhjzhou

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by qianjinyu at 2013-03-21 19:14:02
对一下读码框，看一下东西有没有弄错！如果都没错的话，检查一下上样液里面有没有巯基乙醇，最粗的那个应该是诱导表达条带

上样缓冲液里有巯基乙醇的，那最粗的诱导表达的不是我的目的蛋白啊，比我的目的蛋白大很多，我的目的蛋白只有40多，这个要100多呢，是不是形成的二聚体啊？
赞一下 回复此楼
5楼2013-03-21 19:20:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2rKfVQg2jQww 2026-11-06 4/200 2026-11-07 10:14 by byEJ59EAM6hR
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 23/1150 2026-11-07 06:49 by Equinoxhua
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:23 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 15/750 2026-11-06 13:49 by BkA9Bi5cMhkD
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 10/500 2026-11-06 12:32 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:11 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:15 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭