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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » western blot 杂带问题
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shanmenghan

铁虫 (小有名气)

[求助] western blot 杂带问题

刚做的western blot 发现很多条带，是用anti his tag做一抗 1:3000的比例 4度下孵育过夜，不知道为什么会这么多条带，求高手指点啊

제목 없음.JPG
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1楼 2013-03-15 15:13:07
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉像是没封闭好。
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2楼2013-03-16 02:47:29
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yakir

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

脱脂奶粉封闭2h，然后PBST/TBST洗3次，5min/次，一抗1：5000加到新配制的脱脂奶粉里，孵育1h就好了，然后继续洗3次，5min/次，二抗1：20000（常用）加到新配制的脱脂奶粉里孵育40min，再洗3次，然后就去显色，看荧光强弱来决定压片的时间吧。
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一步一步！
3楼2013-04-01 16:41:16
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