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shanmenghan

铁虫 (小有名气)

[求助] western blot 杂带问题

刚做的western blot 发现很多条带,是用anti his tag做一抗 1:3000的比例 4度下孵育过夜,不知道为什么会这么多条带,求高手指点啊

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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉像是没封闭好。
2楼2013-03-16 02:47:29
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yakir

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

脱脂奶粉封闭2h,然后PBST/TBST洗3次,5min/次,一抗1:5000加到新配制的脱脂奶粉里,孵育1h就好了,然后继续洗3次,5min/次,二抗1:20000(常用)加到新配制的脱脂奶粉里孵育40min,再洗3次,然后就去显色,看荧光强弱来决定压片的时间吧。
一步一步!
3楼2013-04-01 16:41:16
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