24小时热门版块排行榜    

查看: 2425  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

2011210200

金虫 (小有名气)

[求助] 求各位帮忙分析一下PCR电泳图,maker也跑得不好,好伤心……

是土壤总DNA提取后,扩增16srDNA 某片段去做DGGE,PCR后的电泳图如下图,maker是2000bp的,最后条100bp怎么没有?80v,50min跑的跑成这样是啥原因啊?图上最后条应该是250bp,所需片段是250bp左右,好像扩增的效率不是很高啊,有引物二聚体,请各位大牛给点建议嘛,到底是哪里出错了?DNA模板稀释50倍后是300ng/ul左右,PCR体系里就是将模板稀释50倍后加了1ul。

以土壤总DNA为模板扩增16S rDNA序列内的部分片段(200bp左右).JPG



以土壤总DNA为模板扩增16S rDNA序列内的部分片段(200bp左右)2.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈彦利

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by dshlove at 2013-03-20 09:28:51
可能你的退火温度太低了,引物有非特异性结合,P出来非特异性条带了。...

明白!谢谢你!
6楼2013-03-20 10:40:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
2011210200: 金币+5, 有帮助 2013-03-19 12:18:09
感觉你的胶没有溶好,可能有颗粒,或者是倒胶时候部分凝固了。从MARKER上可以看出来。
而且,可能你的退火温度太高了,感觉目的条带模糊一片。为什么跑胶跑那么长时间呢?我们一般这种叫就100V,12min就差不多了。
2楼2013-03-15 15:06:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈彦利

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dshlove at 2013-03-15 15:06:54
感觉你的胶没有溶好,可能有颗粒,或者是倒胶时候部分凝固了。从MARKER上可以看出来。
而且,可能你的退火温度太高了,感觉目的条带模糊一片。为什么跑胶跑那么长时间呢?我们一般这种叫就100V,12min就差不多了。

你好,PCR扩增后出现两条带说明什么问题呀,求指教
3楼2013-03-19 21:48:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

当下的距离

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

漏胶了,重新点样,可能有颗粒,或者是倒胶时候部分凝固了。
youcangetwhatyouwantifyouwantitenough.
4楼2013-03-20 00:37:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856化工专硕求调剂 +7 董boxing 2026-03-01 7/350 2026-03-01 16:02 by hmn_wj
[考研] 材料化工调剂 +9 今夏不夏 2026-03-01 10/500 2026-03-01 16:01 by hmn_wj
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-02-28 7/350 2026-03-01 15:14 by wjLi2017
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 材料284求调剂,一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[考研] 0856材料求调剂 +3 麻辣鱿鱼 2026-02-28 3/150 2026-03-01 14:06 by yc258
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +4 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 4/200 2026-03-01 13:15 by wang_dand
[考研] 0856材料专业298分有科研经历 硕士研究生调剂自荐信 +6 zyf上岸 2026-03-01 6/300 2026-03-01 12:43 by liqiongjy
[考研] 306分材料调剂 +3 chuanzhu川烛 2026-03-01 4/200 2026-03-01 12:32 by houyaoxu
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +3 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 6/300 2026-03-01 11:50 by gaoxiaoniuma
[考研] 材料类求调剂 +8 wana_kiko 2026-02-28 8/400 2026-03-01 11:44 by 王伟要上岸啊
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[考研] 高分子化学与物理调剂 +5 好好好1233 2026-02-28 9/450 2026-03-01 10:59 by fengyu211
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[考研] 272求调剂 +4 田智友 2026-02-28 4/200 2026-03-01 06:43 by 刘兵
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见