24小时热门版块排行榜    

查看: 2444  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

2011210200

金虫 (小有名气)

[求助] 求各位帮忙分析一下PCR电泳图,maker也跑得不好,好伤心……

是土壤总DNA提取后,扩增16srDNA 某片段去做DGGE,PCR后的电泳图如下图,maker是2000bp的,最后条100bp怎么没有?80v,50min跑的跑成这样是啥原因啊?图上最后条应该是250bp,所需片段是250bp左右,好像扩增的效率不是很高啊,有引物二聚体,请各位大牛给点建议嘛,到底是哪里出错了?DNA模板稀释50倍后是300ng/ul左右,PCR体系里就是将模板稀释50倍后加了1ul。

以土壤总DNA为模板扩增16S rDNA序列内的部分片段(200bp左右).JPG



以土壤总DNA为模板扩增16S rDNA序列内的部分片段(200bp左右)2.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈彦利

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dshlove at 2013-03-15 15:06:54
感觉你的胶没有溶好,可能有颗粒,或者是倒胶时候部分凝固了。从MARKER上可以看出来。
而且,可能你的退火温度太高了,感觉目的条带模糊一片。为什么跑胶跑那么长时间呢?我们一般这种叫就100V,12min就差不多了。

你好,PCR扩增后出现两条带说明什么问题呀,求指教
3楼2013-03-19 21:48:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
2011210200: 金币+5, 有帮助 2013-03-19 12:18:09
感觉你的胶没有溶好,可能有颗粒,或者是倒胶时候部分凝固了。从MARKER上可以看出来。
而且,可能你的退火温度太高了,感觉目的条带模糊一片。为什么跑胶跑那么长时间呢?我们一般这种叫就100V,12min就差不多了。
2楼2013-03-15 15:06:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

当下的距离

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

漏胶了,重新点样,可能有颗粒,或者是倒胶时候部分凝固了。
youcangetwhatyouwantifyouwantitenough.
4楼2013-03-20 00:37:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 陈彦利 at 2013-03-19 21:48:18
你好,PCR扩增后出现两条带说明什么问题呀,求指教...

可能你的退火温度太低了,引物有非特异性结合,P出来非特异性条带了。
5楼2013-03-20 09:28:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 生物学调剂 +4 Surekei 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:18 by ilovexiaobin
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +11 吃吃吃才有意义 2026-03-19 11/550 2026-03-21 18:23 by 学员8dgXkO
[考研] 317求调剂 +9 申子申申 2026-03-19 15/750 2026-03-21 17:31 by 学员8dgXkO
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 316求调剂 +6 梁茜雯 2026-03-19 6/300 2026-03-21 06:32 by Ecowxq666!
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂! +3 不想理你 2026-03-16 3/150 2026-03-21 03:59 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +3 wyyyqx 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:20 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +9 梁梁校校 2026-03-17 9/450 2026-03-21 02:17 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 Ma_xt 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:05 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学,080502,354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕,总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 319求调剂 +3 小力气珂珂 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:47 by JourneyLucky
[考研] 298-一志愿中国农业大学-求调剂 +9 手机用户 2026-03-17 9/450 2026-03-20 14:24 by 无懈可击111
[考研] 一志愿985,本科211,0817化学工程与技术319求调剂 +10 Liwangman 2026-03-15 10/500 2026-03-19 10:25 by 无际的草原
[考研] 本科郑州大学物理学院,一志愿华科070200学硕,346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
[考研] 344求调剂 +6 knight344 2026-03-16 7/350 2026-03-18 20:13 by walc
[考研] 0854,计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-15 6/300 2026-03-17 11:05 by 学员h26Tkc
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
信息提示
请填处理意见