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银虫 (初入文坛)

[交流] western blot 没有条带,模糊一片求解原因! 急已有1人参与

最近跑电泳,连续两次做都是没有条带,膜的部分区域模糊一片,都看不清孔道,不知道什么原因!PS:1.样品应该没问题,因为前几天同学帮忙跑了一张,跑出条带,而且我也用同样的上样量结果没出来。2.一抗孵育 4度过夜,洗膜,二抗孵育2小时,洗膜,曝光。3.减膜没问题,为了怕减丢,这回跑的抗体少,减的空间很大。
应该是自己操作的问题,但是就是不知道问题出现在哪?所以心里急,第一次出现这种情况的时候,决定增加上样量,看看是否上样量不够,结果第二次一样。又调了二抗的稀释倍数,均不起作用。会不会是曝光的原因?荧光剂有荧光后,应该把荧光剂吸尽吗?
哪位大神可以救救我!拜托了,跑电泳累够呛,还没有结果,心情真是坏透了。更糟糕的是不知道错在哪?

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zj070804

铁虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-30 19:32:57
跟着你那同学跑就好,两块板,一人做一边。很难找出原因的。只有继续认真做了。祝你好运。
态度决定一切
2楼2013-01-30 17:33:52
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