| 查看: 1932 | 回复: 5 | |||||
[求助]
关于实时荧光定量引物设计
|
|
关于实时荧光定量引物设计，看有的资料说是要夸内含子，那我可不可以直接用CDS呢，或者一个外显子比较大，我在这个外显子里扩呢？ 另外，假如以上都木有好的结果，可不可以在该基因的3'非翻译区设计呢，如果不行的话，又是什么原因呢？ 跪求各路大侠帮忙释疑解难？  |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 核酸生物学实验经验 | 实时定量PCR |
» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有288人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 哪位大侠能帮忙设计荧光定量引物
已经有8人回复
- 求助求助！！！不同大鼠的同一基因的荧光定量实时PCR实验是否需要设计不同的引物
已经有8人回复
- 我的实时定量溶解曲线图，有问题想请教各位！
已经有16人回复
- 求解：实时荧光定量PCR奇峰
已经有18人回复
- 求解：Taqman MGB实时荧光定量PCR空白对照组荧光信号很强怎么回事？
已经有10人回复
- 荧光定量PCR
已经有12人回复
- 实时荧光RT-PCR实验的相关问题
已经有8人回复
- 荧光定量 Real time 引物设计为什么要跨内含子？
已经有4人回复
- 实时荧光定量的数据导出后怎么处理啊？
已经有17人回复
- Taqman实时荧光定量PCR本地信号过强是什么原因？
已经有7人回复
- 荧光定量问题
已经有4人回复
- 为什么荧光定量后还要跑电泳呢
已经有15人回复
- 小麦叶片RNA实时荧光Ct值过高
已经有5人回复
- 荧光定量PCR与普通PCR产物不一样？
已经有6人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR与半定量的RT－PCR在设计引物时有什么区别？
已经有8人回复
- 【分享】荧光定量PCR简介
已经有13人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR引物跨内含子的问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】荧光定量引物设计遇到的问题
已经有3人回复
- 【分享】荧光定量PCR实验指南（一）
已经有20人回复
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
ttxs992楼2013-01-21 10:12:00
3楼2013-01-21 12:27:46
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
4楼2013-01-21 15:03:17
5楼2013-01-21 19:27:33
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
ttxs99: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 谢谢你的耐心回复~~~~ 2013-01-22 11:12:43
ttxs99: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 谢谢你的耐心回复~~~~ 2013-01-22 11:12:43
|
做定量的反转录前RNA样品都需要进行DNase消化的。消化掉基因组DNA这一步是非常重要的。否则即使扩增片段不同，DNA模板扩增出来的产物也是会生成荧光的，会影响定量结果。而且DNA模板也会竞争引物。只是，如果扩增片段大小不同，熔解曲线中会形成不同的peak，很容易从PCR结果看出样品是否存在痕量基因组DNA。所以，如果为了省钱，可以不用在逆转录时做我前面提到的负对照。如果没有夸内含子的话，这个负对照是必需做的。 |
6楼2013-01-22 02:17:33
