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质粒快抽有条带,提取时却没有了,什么问题啊?
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piaoyunokok
木虫
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质粒快抽有条带,提取时却没有了,什么问题啊?
如题,最近试验转化大肠杆菌E.Coli DH5α,氨苄抗性,做质粒快抽时有条带,而且条带还很亮的,可是扩培(加入抗生素)后,却提不出质粒来,半点条带都没有,请教各位高手到底是什么原因?????
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2013-01-16 16:39:50
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piaoyunokok
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9楼
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Originally posted by
cicelyzh
at 2013-01-22 15:24:10
菌落PCR因为模板比较脏,的确可能会出现多条带的问题。主要是注意不要弄太多菌造成模板量过大。我一般是用无菌枪头挑单菌落,先在一块LB板上备份菌落,然后在PCR管底部搅若干下就可以了。...
呃?我的是菌液,就直接取了2微升的菌液,稀释10倍后,取稀释液1微升做的PCR。这个还算不算浓啊?
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10楼
2013-01-24 09:45:32
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cicelyzh
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★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
能确定快抽时的条带是目的质粒吗?快抽时看到的亮的条带不会是RNA吧。
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3楼
2013-01-17 08:53:00
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piaoyunokok
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cicelyzh
at 2013-01-17 08:53:00
能确定快抽时的条带是目的质粒吗?快抽时看到的亮的条带不会是RNA吧。
呃?可是只有一条带的啊,RNA不止一条带的,而且RNA很容易降解的,提取基因组时也是最下面一团的,这个真的是一条亮带的哦。。。。你们快抽时使用的什么方法呢?可以确定跑出来的是什么东西么?
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4楼
2013-01-17 09:03:14
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cicelyzh
at 2013-01-17 08:53:00
能确定快抽时的条带是目的质粒吗?快抽时看到的亮的条带不会是RNA吧。
呃?RNA不是一条带的吧,它不会降解的么?你们快抽使用的什么方法呢?可以确定跑出来的是什么东西吗?
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5楼
2013-01-17 09:04:36
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