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pumpkin236铁虫 (小有名气)
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[求助]
关于蛋白质银染的问题请教
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最近做了银染 结果不好 有没有懂的朋友帮忙看下 怎么改进 让结果更清楚 下面是染色结果：发现最后显色的时候 上部分高分子量蛋白质很密集 一下子条带就很深 下面小分子很浅 等下面部分小分子量条带出来了以后吧 上面颜色深的看不见了 不知道怎么改进 左边两个条带是marker，接着两个是银染的marker（条带不知道为什么没有显示出来），接着是样品，胶用的10%，用的pierce的银染kit。 懂的朋友希望给一些改进意见。 DSC_0468.jpg(1.81MB) http://kuai.xunlei.com/d/LnU4DdoOiRTuUAQA7fb?p=130497 |
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【答案】应助回帖
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amisking: 回帖置顶 2013-01-10 20:29:04
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pumpkin236: 金币+2 2013-01-11 01:19:06
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pumpkin236: 金币+2 2013-01-11 01:19:06
| 感觉你的样品没有制好似的。泳道内有纵向拖尾。洗玻璃板时最后要用mili-q润洗。不知道你做的什么样品，是否在小分子量区的蛋白比较少。一般的样品也有这种趋势，蛋白在一定分子量区会比较密集。如果想让胶上下均匀一点，可以做梯度胶试试。此外，银染很灵敏，不知道你的上样量是多少ug蛋白，跑的是多大的胶。没有用kit银染过，不知道是不是kit的问题。说实话啊，我不喜欢pierce的东西。 |
3楼2013-01-10 11:18:23
pumpkin236
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