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【求助】{蛋白质测定相关问题 已有9人参与
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我现在在做酶解虾壳粉提取蛋白的实验，其酶解液将作为风味料反应的基液。 我先前一直用凯氏定氮法测定酶解液中蛋白含量，但结果发现加入酶和没加入酶的含氮量基本相同，我已排除加酶量、酶解时间以及所加入的酶的问题，这到底是怎么回事呢？是不是测定方法本身的问题？求高手解释，谢谢！ PS：也有师姐跟我说会不会是我的虾壳粉（虾头、虾壳、虾脚粉碎而成）因为前处理是低温（50~60度）烘干的，虾本身含有的酶没有被灭活的缘故。可是一个老师跟我说，烘5~6小时这么长时间，酶早就灭活了。 把昨天的补充一下： 今天，我让师姐用福林酚法测了一下，之前我做的处理是：5g虾粉：100ml缓冲液，分三组，第一组不加酶；第二组加复合蛋白酶，第三组加风味蛋白酶。蛋白酶添加量均为原料重量的0.2%，50度水解3小时，100度灭酶10min，离心取上清，均定容至100ml。师姐用我的料液稀释30倍后测得的吸光度是：第一组 0.513；第二组 0.525； 第三组 0.544 师姐说后面两个值与她之前做的差不多，但没有加酶的第一组数值却比她做过的高很多。她所用的虾粉前处理用过105度烘干，我的只是低温烘干，这么看来难道是我的原料前处理的关系吗？ [ Last edited by 黑色月光 on 2010-7-15 at 23:02 ] |
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