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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 【求助】{蛋白质测定相关问题
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查看: 2012  |  回复: 16
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黑色月光

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 柳飞绵 at 2010-07-16 08:57:48:
灭活不灭活应该不影响凯氏定氮法的结果啊。我感觉可能酶加的太少了，方法存在误差，100g加0.2g酶，蛋白质含量才44.2左右，何况你才取了5g,才2.21g蛋白，其中酶的含量才0.01g。凯氏定氮法好像没有这个精度啊

不过看来也不像是虾壳本身所带内源酶的问题。
今天我用福林酚法做了一下，并且把酶解过程中加的酶提高到了原料的1%，而且我把我的原料虾粉也进行了105度烘干，可是测定结果仍然不理想，试样稀释30倍后，680nm下吸光度为：未加酶的 0.586；加入复合蛋白酶的 0.593；加入风味蛋白酶的 0.590。
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11楼2010-07-18 04:53:29
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imwjc

金虫 (小有名气)
★
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我觉得，不能用凯氏定氮的方法测定，凯氏定氮测的是N的含量，酶水解后N的含量是不会变的。
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12楼2010-07-18 21:40:43
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黑色月光

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by imwjc at 2010-07-18 21:40:43:
我觉得，不能用凯氏定氮的方法测定，凯氏定氮测的是N的含量，酶水解后N的含量是不会变的。

可是有一部分与虾壳结合的蛋白难道不会在水解过程中被酶解离后变成短肽或氨基酸溶于水吗？
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13楼2010-07-18 23:25:53
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fanliang1389

荣誉版主 (文坛精英)

有爱的二哥

优秀版主优秀版主
那和水解温度有关系吗？在低温下水解试试？
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14楼2010-08-06 15:23:41
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rickwu

木虫 (初入文坛)
★
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把水解时间加长些，多做几组平行试验再看看
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15楼2010-08-06 15:42:38
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ljf2608

金虫 (正式写手)
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我觉得你的方法有问题，不应该用凯氏定氮法，此法通过消化的过程，可以将未溶解的蛋白质的氮也测出来，测得是总氮。你选用的方法有问题。关于你师姐帮你测得那组实验，你可以考虑一下你的背景颜色和选用的空白实验的颜色的差别。
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加油！努力！
16楼2010-08-08 21:55:59
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zengsimin

铁虫 (初入文坛)
★
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树树8013: 这个帖子已经是很久的帖子了，你可以重新在论坛发贴求助。 2012-07-07 21:39:48
我想请教一下你酶的添加量是怎么确定的？你的酶酶活是多少啊？
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17楼2012-07-07 11:41:30
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