版块导航: 正在加载中...

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (2381)
>导师招生 (152)
>考研 (132)
>考博 (70)
>虫友互识 (49)
>基金申请 (28)
>休闲灌水 (23)
>硕博家园 (18)
>论文投稿 (14)
>文献求助 (12)
>农林 (8)
>博后之家 (5)
>招聘信息布告栏 (4)
>找工作 (4)
>公派出国 (4)
>教师之家 (3)

返回列表

leezz

铜虫 (小有名气)

愤青

应助: 0 (幼儿园)
金币: 102.6
散金: 127
红花: 1
帖子: 188
在线: 134.2小时
虫号: 832985
注册: 2009-08-23
性别: GG
专业: 基因表达调控与表观遗传学

[求助] RNA PCR有关问题

hi，大家好：
请问大家有没有做RNA PCR的，对于一条序列未知的RNA怎么PCR呢？有没有RNA PCR相关的通用引物。谢谢

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

PCR提总RNA时，最后溶于DEPC水时有沉淀，不能完全溶解，是什么原因，能怎么补救已经有8人回复
关于RT-PCR中逆转录试剂盒的问题！已经有18人回复
有关RT-PCR模板RNA量的问题，请高手解答！！！已经有16人回复
RT-PCR相关问题已经有16人回复
请帮忙分析一下提取RNA遇到的问题已经有19人回复
提取RNA与做RT-PCR的问题已经有26人回复
rt-pcr图，请大神们帮助分析一下，急。。。谢谢。。。已经有20人回复
求助！关于RT-PCR的问题！已经有20人回复
cDNA做普通PCR扩不出条带来已经有13人回复
关于RNA以及cDNA电泳问题，拜求各位大侠指点已经有10人回复
大家帮忙分析一下PCR电泳图已经有14人回复
【求助/交流】RNA质量与qRT-PCR 已经有13人回复
【求助/交流】关于RNA的问题已经有13人回复
【求助/交流】RNA降解问题求赐教已经有16人回复
【求助/交流】关于pcr内参b-actine的一个问题已经有5人回复
【求助/交流】RNA的提取问题和qRT-PCR分析基因在不同时间的定量表达已经有10人回复
【求助/交流】关于PCR的问题已经有18人回复
【求助/交流】从RNA到cDNA合成再到克隆PCR的实验技巧和操作细节问题若干，寻求解答已经有12人回复

1楼 2013-01-04 14:13:13

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yjcheng

金虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 815.5
红花: 1
帖子: 190
在线: 98.6小时
虫号: 428047
注册: 2007-08-02
性别: GG
专业: 环境生物化学

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2013-01-04 20:01:53

你的RNA中是否有PolyA,若有可用Poly作为一条引物，另外一条可用6个或8个核苷酸的简并引物。扩增出片段之后测序。再做inverse PCR (IPCR)(Huang, Molecular Biotechnology,2: 15–22.1994).就可以得到侧翼的序列。

赞一下

回复此楼

2楼2013-01-04 15:38:47

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

MolEPI: 10
应助: 1662 (讲师)
金币: 8693.8
红花: 72
帖子: 3516
在线: 456小时
虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

第一次听说RNA还能做PCR的，是我孤陋寡闻了吗？生命体中的RNA不是单链的吗，它没有像DNA那样的复制机理。有病毒编码的酶能够以单链RNA为模板形成dsRNA的。PCR是以DNA为模板的扩增技术，一般想扩增RNA需要先反转录成cDNA才能PCR吧。

赞一下

回复此楼

3楼2013-01-04 15:39:14

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yjcheng

金虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 815.5
红花: 1
帖子: 190
在线: 98.6小时
虫号: 428047
注册: 2007-08-02
性别: GG
专业: 环境生物化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking: 回帖置顶 2013-01-04 20:01:58
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流问题。 2013-01-04 20:02:05

上面回答有两次笔误，一是PolyT；二，是随机引物不是随机引物不是简并引物。

你的RNA中是否有PolyA,若有可用PolyT作为一条引物，另外一条可用6个或8个核苷酸的随机引物。扩增出片段之后测序。再做inverse PCR (IPCR)(Huang, Molecular Biotechnology,2: 15–22.1994).就可以得到侧翼的序列。

赞一下

回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

leezz

4楼2013-01-04 15:42:53

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yjcheng

金虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 815.5
红花: 1
帖子: 190
在线: 98.6小时
虫号: 428047
注册: 2007-08-02
性别: GG
专业: 环境生物化学

引用回帖:

3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-04 15:39:14
第一次听说RNA还能做PCR的，是我孤陋寡闻了吗？生命体中的RNA不是单链的吗，它没有像DNA那样的复制机理。有病毒编码的酶能够以单链RNA为模板形成dsRNA的。PCR是以DNA为模板的扩增技术，一般想扩增RNA需要先反转录成 ...

一步RT-PCR知道不？！

赞一下

回复此楼

5楼2013-01-04 15:49:40

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖