24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 933  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

shijie2280

新虫 (初入文坛)

[求助] 原核表达大量出不来结果

我表达结核杆菌的一个基因,虽然小量表达时有明显调大,但为什么大量表达时总表达不出来呢?求高手指点
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

molecula

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

如果是载体表达的话,大量表达的情况下有时候会出现堵塞效应。
换句话说,你挑的量太大了,以至于这个基因表达的路线被堵塞了,转而进行了其他结构性基因的表达了。
你试一试调低一点表达。看看是不是能做出来。
再就是菌浓度太高也会抑制表达。
你试一下不要培养太久。
4楼2013-01-04 12:48:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用的什么载体,pet28a吗? 大量表达和小量表达时用的诱导条件是否一致,IPTG、温度、时间等
科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
2楼2012-12-28 11:15:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shijie2280

新虫 (初入文坛)

pGEX4T-1,带GST标签的,所有的都一样
3楼2012-12-28 11:56:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

我也是pGEX-4T-1的融合表达,没有碰到楼主所说的这种情况,首先你可以从小量诱导下手,先优化一下小量诱导的条件,使表达量最大化,然后用这个条件再去做做大量表达试试看,一般少量表达可以大量表达是不会出什么问题的.
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
5楼2013-01-04 14:14:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703 化学 求调剂,一志愿山东大学 342 分 +7 Shern—- 2026-03-28 7/350 2026-03-30 16:31 by nothing投稿中
[考研] 材料专硕 085600求调剂 +6 BBQ233 2026-03-30 6/300 2026-03-30 16:26 by wangjy2002
[考研] 303求调剂 +4 DLkz1314. 2026-03-30 4/200 2026-03-30 16:18 by JourneyLucky
[硕博家园] 求调剂 有机化学考研356分 +10 Nadiums 2026-03-25 11/550 2026-03-30 11:56 by yjolah
[考研] 一志愿南开大学0710生物学359求调剂 +5 兔兔兔111223314 2026-03-29 5/250 2026-03-30 10:41 by malone0211
[考研] 317求调剂 +10 蛋黄咸肉粽 2026-03-26 10/500 2026-03-30 09:45 by longlotian
[考研] 085600 286分 材料求调剂 +10 麻辣鱿鱼 2026-03-27 11/550 2026-03-29 21:52 by nanaliuyun
[考研] 327求调剂 +6 汲亦昊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:40 by peike
[考研] 291求调剂 +5 Y-cap 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:18 by mumin1990
[考研] 一志愿北京理工大学本科211材料工程294求调剂 +8 mikasa的围巾 2026-03-28 8/400 2026-03-29 12:48 by 无际的草原
[考研] 求调剂,一志愿 南京航空航天大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +7 @taotao 2026-03-29 7/350 2026-03-29 12:03 by longlotian
[考研] 0856材料化工调剂 总分330 +14 zhubinhao 2026-03-27 14/700 2026-03-29 10:01 by Sjndkwm
[考研] 321求调剂 +7 璞玉~~ 2026-03-25 8/400 2026-03-29 06:41 by 544594351
[考研] 11408软件工程求调剂 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 21:50 by zhq0425
[考研] 295材料工程专硕求调剂 +7 1428151015 2026-03-27 7/350 2026-03-28 19:58 by S240
[考研] 330一志愿中国海洋大学 化学工程 085602 有读博意愿 求调剂 +3 wywy.. 2026-03-27 4/200 2026-03-28 03:32 by fmesaito
[考研] 315调剂 +4 0860求调剂 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:23 by wangjy2002
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 各位老师您好:本人初试372分 +5 jj涌77 2026-03-25 6/300 2026-03-25 14:15 by mapenggao
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
信息提示
请填处理意见