24小时热门版块排行榜    

查看: 1392  |  回复: 3
本帖产生 2 个 MolEPI ,点击这里进行查看

nnsulei

金虫 (正式写手)

[交流] 原核表达大的核苷酸序列容易表达吗? 已有3人参与

我最近做原核表达怎么也表达不出来,不知道是什么原因啊!目的基因1431bp。我的表达菌是BL21,载体是PGEX-6P-1,加TPTG诱导37度/3h.
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

努力做就有结果~
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+5, EPI+1): 言简意赅,涉及很多方面,楼主可据此一一检查哦 2011-06-17 20:06:17
引用回帖:
Originally posted by nnsulei at 2011-06-17 16:51:58:
我最近做原核表达怎么也表达不出来,不知道是什么原因啊!目的基因1431bp。我的表达菌是BL21,载体是PGEX-6P-1,加TPTG诱导37度/3h.

1431bp基因不算大的,文献100KD的蛋白都能表达出来。能不能表达和表达的量跟表达体系有关,比如载体、宿主,也跟表达条件、要表达蛋白的性质有关,而且跟基因的来源也有关,涉及密码子偏爱性问题。
2楼2011-06-17 18:26:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+5, EPI+1): 切实可行! 2011-06-17 20:07:03
西瓜: 专家考核存档 2011-06-17 20:47:29
1:确定好你的基因成功连接至载体上了;
2:可以尝试不同温度,不同培养时间,不同的IPTG浓度进行诱导。
3:实在不行,换载体,换宿主。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-06-17 19:33:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DNA_STR

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+2): 欢迎交流 2011-06-18 21:54:47
Taq酶基因2496bp,我们都表达出来了,而且活性跟商业的没有差别。
开始我们用pET载体在大肠杆菌各个菌株中都表达,可没有活性;过后认真分析,看文献,重新构建载体,表达出有活性的Taq酶。
努力吧!
4楼2011-06-18 19:13:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nnsulei 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂 +4 曼殊2266 2026-03-18 4/200 2026-03-20 07:17 by Iveryant
[考研] 271材料工程求调剂 +6 .6lL 2026-03-18 6/300 2026-03-19 15:41 by haoshis
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +17 不知道叫什么! 2026-03-15 19/950 2026-03-19 15:06 by 尽舜尧1
[考研] 化学求调剂 +3 临泽境llllll 2026-03-17 4/200 2026-03-19 13:59 by houyaoxu
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-19 3/150 2026-03-19 13:36 by houyaoxu
[考研] 0817调剂 +3 没有答案_ 2026-03-14 3/150 2026-03-19 09:51 by Xu de nuo
[考研] 274求调剂 +6 S.H1 2026-03-18 6/300 2026-03-19 09:34 by 花店相见
[考研] 本科郑州大学物理学院,一志愿华科070200学硕,346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
[考研] 0703化学 305求调剂 +4 FY_yy 2026-03-14 4/200 2026-03-19 05:54 by anny19840123
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +3 xbxudjdn 2026-03-18 3/150 2026-03-18 22:14 by zhq0425
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +7 步川酷紫123 2026-03-13 7/350 2026-03-18 17:12 by 尽舜尧1
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +5 梨花珞晚风 2026-03-17 5/250 2026-03-18 14:49 by haxia
[考研] 311求调剂 +6 26研0 2026-03-15 6/300 2026-03-18 14:43 by haxia
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 278求调剂 +3 Yy7400 2026-03-13 3/150 2026-03-17 08:24 by laoshidan
[考研] 0854控制工程 359求调剂 可跨专业 +3 626776879 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:42 by 626776879
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
信息提示
请填处理意见