原核表达大的核苷酸序列容易表达吗？ - 分子生物 - 综合其他

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至尊木虫 (著名写手)

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+5, EPI+1): 言简意赅，涉及很多方面，楼主可据此一一检查哦 2011-06-17 20:06:17

引用回帖:

Originally posted by nnsulei at 2011-06-17 16:51:58:
我最近做原核表达怎么也表达不出来，不知道是什么原因啊！目的基因1431bp。我的表达菌是BL21,载体是PGEX-6P-1,加TPTG诱导37度/3h.

1431bp基因不算大的，文献100KD的蛋白都能表达出来。能不能表达和表达的量跟表达体系有关，比如载体、宿主，也跟表达条件、要表达蛋白的性质有关，而且跟基因的来源也有关，涉及密码子偏爱性问题。

2楼2011-06-17 18:26:49

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Robot (super robot)

我们都爱小木虫

找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~

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T.Shen

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西瓜(金币+5, EPI+1): 切实可行！ 2011-06-17 20:07:03
西瓜: 专家考核存档 2011-06-17 20:47:29

1:确定好你的基因成功连接至载体上了；
2：可以尝试不同温度，不同培养时间，不同的IPTG浓度进行诱导。
3：实在不行，换载体，换宿主。

Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!

3楼2011-06-17 19:33:02

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