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tongxinkxy

银虫 (小有名气)

[求助] 原核表达和酵母表达

我要表达一个蛋白
成熟蛋白会被切割成5个肽链,组成5聚体,而且有糖基化修饰
请问原核表达和酵母表达是否可以完成这个修饰?
是否表达结束后自动切割,然后也会形成5聚体
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

你的蛋白质是从什么生物中得来的
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-07-20 02:50:28
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tongxinkxy

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-07-20 02:50:28:
你的蛋白质是从什么生物中得来的

3楼2011-07-20 08:04:03
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 感谢参与 2011-07-21 09:46:51
一般认为来自真核生物的基因要用真核生物宿主来表达,因为原核生物不一定能识别真核生物基因的启动子,当然也可以去掉启动子来表达。但是那些RNA剪辑和蛋白质折叠的可能大肠杆菌做不来,糖基化也是较差的,所以建议先试一下酵母。虽然酵母也不一定能剪辑和折叠得那么好,但起码可能性大一些。
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4楼2011-07-20 19:53:26
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tongxinkxy

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-07-20 19:53:26:
一般认为来自真核生物的基因要用真核生物宿主来表达,因为原核生物不一定能识别真核生物基因的启动子,当然也可以去掉启动子来表达。但是那些RNA剪辑和蛋白质折叠的可能大肠杆菌做不来,糖基化也是较差的,所以建 ...

谢谢您,我不知道怎么送不了金币,说什么不是应助贴,

我再问问你吧,是不是酵母液不一定可以?酵母表达之后,是不是就是5聚体的?跑SDS-蛋白质电泳,会出来5条带?
5楼2011-07-20 21:40:18
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
lstt09nk(金币+5, EPI+1): Good 2011-07-21 09:47:14
我金币已经够多了,所以回帖的时候一般不选应助。

你要表达的基因来自羊,酵母虽然是真核生物,但它是微生物,不是动物,说不定动物表达所需的一整套系统在酵母体内有所不同。你有没有想过用哺乳动物的表达系统,例如仓鼠?

狂犬病毒aG株糖蛋白在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中的表达
http://so.med.wanfangdata.com.cn ... ePaper_Y762080.aspx

http://wenku.baidu.com/view/e66919e881c758f5f61f67bb.html
CHO细胞(中国仓鼠卵巢细胞)表达系统_百度文库

http://muchong.com/journal/article.php?id=CJFDTotal-SWGJ200505009
分泌表达bFGF的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的构建及其特性分析
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6楼2011-07-20 22:16:06
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