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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】原核基因在酵母中表达？
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xzx135

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】原核基因在酵母中表达？ 已有3人参与

我想做一个原核的基因在酵母中表达，用pPIC3.5K，还有pPIC9K做穿梭载体，设计酶切位点的时候没有考虑到阅读框的问题，请问要在酵母里表达会不会因为阅读框不正确而导致蛋白表达的不正确？或者根本表达不出来？
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1楼 2010-05-25 14:30:57
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zhmy26

金虫 (正式写手)
载体上面所添加的多克隆位点不存在这样的问题吧。应该没问题。
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2楼2010-05-25 17:01:18
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wgl365

银虫 (小有名气)

关于酵母表达

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼主你到底选什么表达呀？胞内还是胞外？还有，要保证你的基因上不要有你选用的酶的酶切位点哦，否则基因就被切开喽！
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思想是行动的种子！
3楼2010-05-25 21:03:15
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
会的，pPIC3.5K为胞内表达载体，需要自己添加起始密码子，终止子可以自己添加，也可以利用载体上的终止密码子，但是利用载体终止密码子的时候注意不要移码了。
pPIC9K是分泌型表达载体，翻译是从α-factor开始的，所以选择酶切位点是就要注意你的编码框要和载体序列对应了，不然就移码了。
赞一下(1人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
4楼2010-05-26 14:38:20
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