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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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761429495

新虫 (小有名气)


[交流] 目的片段与载体连接

虫虫们:
   我的两个酶切位点一个切出的是平末端 一个切出的是黏末端,始终连接不上,我想未下怎么做能够提高连接效率?知道的童鞋请赐教呀,做了好久一直连不上,愁死了
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


★ ★ ★ ★
761429495(金币+1): 谢谢参与
scelab: 金币+3, 谢谢交流 2012-12-25 13:23:09
平末端连接效率低一些,一般16°C过夜是没问题的。
2楼2012-12-25 10:49:25
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475502411

铜虫 (著名写手)


★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
scelab: 金币+5, 谢谢交流 2012-12-25 13:23:17
你要保证你是切开的,这个还是很好连接的。
你的两个酶的酶切效率怎么样,能不能用你哥Buffer啊?效率不行就酶切两次,第一次酶切后直接回收,第二次再跑胶回收。酶切回收后跑胶看看酶切的效果。最好测一下浓度按说明书的比例进行连接。
16度过夜连接时没有问题的
祝好
3楼2012-12-25 11:58:27
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望海思月

铜虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
要先将粘端补平,然后再平端相连
4楼2012-12-25 14:12:44
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55晴朗天天

铜虫 (小有名气)


学习啦~祝好~
5楼2012-12-25 14:48:33
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