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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 目的片段与载体连接
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761429495

新虫 (小有名气)

[交流] 目的片段与载体连接

虫虫们：
   我的两个酶切位点一个切出的是平末端 一个切出的是黏末端，始终连接不上，我想未下怎么做能够提高连接效率？知道的童鞋请赐教呀，做了好久一直连不上，愁死了
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1楼 2012-12-25 09:26:10
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475502411

铜虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
scelab: 金币+5, 谢谢交流 2012-12-25 13:23:17
你要保证你是切开的，这个还是很好连接的。
你的两个酶的酶切效率怎么样，能不能用你哥Buffer啊？效率不行就酶切两次，第一次酶切后直接回收，第二次再跑胶回收。酶切回收后跑胶看看酶切的效果。最好测一下浓度按说明书的比例进行连接。
16度过夜连接时没有问题的
祝好
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3楼2012-12-25 11:58:27
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★
761429495(金币+1): 谢谢参与
scelab: 金币+3, 谢谢交流 2012-12-25 13:23:09
平末端连接效率低一些，一般16°C过夜是没问题的。
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2楼2012-12-25 10:49:25
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望海思月

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
要先将粘端补平，然后再平端相连
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4楼2012-12-25 14:12:44
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