24小时热门版块排行榜    

查看: 1984  |  回复: 4

guyue900905

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于rna反转录时的问题~~~紧急 ,希望高手指点

我从羊的肌肉组织提取出了rna,现在想把它转录成cdna,不知道反转录时rna的浓度,这个浓度是我自己摸索那?还是说有固定的组织的浓度?要是自己摸索,具体怎么摸索,在什么范围做浓度梯度?紧急 ,谢谢格外高手。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangyubaoer

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-12-24 19:02:23
楼主抽完RNA后应该测了浓度了吧?我们做反转录时用的是10μl的体系,把RNA定到1μg。也就是说,假如你的RNA浓度为500ng/μl,做反转录的时候就加2μl的RNA。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-12-24 10:34:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guyue900905

新虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiangyubaoer at 2012-12-24 10:34:56
楼主抽完RNA后应该测了浓度了吧?我们做反转录时用的是10μl的体系,把RNA定到1μg。也就是说,假如你的RNA浓度为500ng/μl,做反转录的时候就加2μl的RNA。

我也测得 , 大约为1000到2000ng/ul之间,你们这个量是根据说明书的来了是么?用的什么试剂盒呀?谢谢
3楼2012-12-24 10:52:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangyubaoer

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-12-24 19:02:34
引用回帖:
3楼: Originally posted by guyue900905 at 2012-12-24 10:52:38
我也测得 , 大约为1000到2000ng/ul之间,你们这个量是根据说明书的来了是么?用的什么试剂盒呀?谢谢...

我们用的是takara的盒子,编号DRR037S,http://www.takara.com.cn/?Plat=p ... =738&subclass=1,这是网址,上面有说明书,可以看看。我们的量貌似比说明书上的大,但做出来挺好的。
4楼2012-12-24 11:11:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ccharlien

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般反转录个1到5ug都可以 问题不大
5楼2012-12-24 21:30:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 guyue900905 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生(3个名额)地质化工冶金领域 +53 AI8RaGaPaSCR 2026-08-07 56/2800 2026-08-14 03:45 by ewawPFgefjcL
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 28/1400 2026-08-13 17:51 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 documentary 2026-08-10 16/800 2026-08-13 16:39 by 润生71
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
信息提示
请填处理意见