24小时热门版块排行榜    

查看: 2077  |  回复: 4

guyue900905

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于rna反转录时的问题~~~紧急 ,希望高手指点

我从羊的肌肉组织提取出了rna,现在想把它转录成cdna,不知道反转录时rna的浓度,这个浓度是我自己摸索那?还是说有固定的组织的浓度?要是自己摸索,具体怎么摸索,在什么范围做浓度梯度?紧急 ,谢谢格外高手。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangyubaoer

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-12-24 19:02:23
楼主抽完RNA后应该测了浓度了吧?我们做反转录时用的是10μl的体系,把RNA定到1μg。也就是说,假如你的RNA浓度为500ng/μl,做反转录的时候就加2μl的RNA。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-12-24 10:34:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guyue900905

新虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiangyubaoer at 2012-12-24 10:34:56
楼主抽完RNA后应该测了浓度了吧?我们做反转录时用的是10μl的体系,把RNA定到1μg。也就是说,假如你的RNA浓度为500ng/μl,做反转录的时候就加2μl的RNA。

我也测得 , 大约为1000到2000ng/ul之间,你们这个量是根据说明书的来了是么?用的什么试剂盒呀?谢谢
3楼2012-12-24 10:52:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangyubaoer

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-12-24 19:02:34
引用回帖:
3楼: Originally posted by guyue900905 at 2012-12-24 10:52:38
我也测得 , 大约为1000到2000ng/ul之间,你们这个量是根据说明书的来了是么?用的什么试剂盒呀?谢谢...

我们用的是takara的盒子,编号DRR037S,http://www.takara.com.cn/?Plat=p ... =738&subclass=1,这是网址,上面有说明书,可以看看。我们的量貌似比说明书上的大,但做出来挺好的。
4楼2012-12-24 11:11:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ccharlien

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般反转录个1到5ug都可以 问题不大
5楼2012-12-24 21:30:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 guyue900905 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 极限拉扯,如何抉择 +11 Isak0320 2026-10-12 15/750 2026-10-14 21:55 by 猫鱼不是鱼
[硕博家园] 中科院海洋所招收海洋材料相关领域博士研究生及研究助理 +3 sujiner 2026-10-08 4/200 2026-10-14 20:40 by qicaiyun
[职场人生] 40+中年人失业后,还能找到好工作吗? +3 xqy2009 2026-10-13 3/150 2026-10-14 20:17 by 43358052
[论文投稿] 二审4个多月了还是Awaiting Reviewer Scores 10+3 纳斯达克ML 2026-10-11 4/200 2026-10-14 17:30 by babero
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了,离AI做有机合成还有多远? +8 wangyl_123 2026-10-10 13/650 2026-10-14 15:12 by zuesli
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么? +4 好运来~9527 2026-10-10 7/350 2026-10-13 08:41 by xli1984
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费,对账才发现官费比别人多掏了一倍 +6 13108017953 2026-10-08 6/300 2026-10-12 20:07 by w3w3y3
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷!
[有机交流] 各位大佬,路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些? +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
请填处理意见