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guyue900905

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于rna反转录时的问题~~~紧急 ,希望高手指点

我从羊的肌肉组织提取出了rna,现在想把它转录成cdna,不知道反转录时rna的浓度,这个浓度是我自己摸索那?还是说有固定的组织的浓度?要是自己摸索,具体怎么摸索,在什么范围做浓度梯度?紧急 ,谢谢格外高手。
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xiangyubaoer

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-12-24 19:02:23
楼主抽完RNA后应该测了浓度了吧?我们做反转录时用的是10μl的体系,把RNA定到1μg。也就是说,假如你的RNA浓度为500ng/μl,做反转录的时候就加2μl的RNA。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-12-24 10:34:56
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guyue900905

新虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiangyubaoer at 2012-12-24 10:34:56
楼主抽完RNA后应该测了浓度了吧?我们做反转录时用的是10μl的体系,把RNA定到1μg。也就是说,假如你的RNA浓度为500ng/μl,做反转录的时候就加2μl的RNA。

我也测得 , 大约为1000到2000ng/ul之间,你们这个量是根据说明书的来了是么?用的什么试剂盒呀?谢谢
3楼2012-12-24 10:52:38
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xiangyubaoer

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-12-24 19:02:34
引用回帖:
3楼: Originally posted by guyue900905 at 2012-12-24 10:52:38
我也测得 , 大约为1000到2000ng/ul之间,你们这个量是根据说明书的来了是么?用的什么试剂盒呀?谢谢...

我们用的是takara的盒子,编号DRR037S,http://www.takara.com.cn/?Plat=p ... =738&subclass=1,这是网址,上面有说明书,可以看看。我们的量貌似比说明书上的大,但做出来挺好的。
4楼2012-12-24 11:11:52
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ccharlien

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般反转录个1到5ug都可以 问题不大
5楼2012-12-24 21:30:17
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