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看天

木虫 (知名作家)


[交流] PCR为什么需要2条引物?

为什么需要两条才有特定片段出来?
不要告诉我一条会怎么样,我想知道为什么两条会这样。
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看天: 金币+5 2012-12-10 12:11:04
用上下游引物扩增后,会形成互补的双链,这样在DNA聚合酶的作用下互补双链被切下来,那些多余的成分没有互补的就不是你需要的了,所以你得到的是特定片段的大小
19楼2012-12-10 11:35:22
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酶切专家

金虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
学习一下PCR的基本原理就明白了
3楼2012-12-07 22:40:33
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看天: 金币+5, 谢谢回答,我的问题是为什么两条引物就只能把他们之间序列P出来? 2012-12-07 22:50:09
amisking: 回帖置顶 2012-12-08 18:55:23
两条引物是指数扩增,即PCR合成的新链可以作为下一轮PCR的模板,假设你其实模板DNA的量为a, 你PCR循环为x,那么X个循环结束后,你的目标DNA的量为 a * 2^x(这里假设扩增效率是2)

一条引物是线性扩增,模板始终是你加入的DNA模板,而且产物都是单链的,如果还是上述条件,X个循环结束后,你的目标DNA的量为 x*a,且为单链,扩增后的得到的DNA量天壤之别

两条引物扩增和单引物扩增在实际中都有应用
当你做克隆时,你需要双引物扩增,一因为你需要足够量的DNA,二单链的DNA,你克隆不上载体
当在做测序是,就要当引物扩增了
4楼2012-12-07 22:45:07
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看天

木虫 (知名作家)


我的问题是为什么两条引物就只能把他们之间序列P出来
5楼2012-12-07 22:50:33
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