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看天

木虫 (知名作家)

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[交流] PCR为什么需要2条引物？

为什么需要两条才有特定片段出来？
不要告诉我一条会怎么样，我想知道为什么两条会这样。

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1楼 2012-12-07 22:03:58

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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看天: 金币+5, 谢谢回答，我的问题是为什么两条引物就只能把他们之间序列P出来？ 2012-12-07 22:50:09
amisking: 回帖置顶 2012-12-08 18:55:23

两条引物是指数扩增，即PCR合成的新链可以作为下一轮PCR的模板，假设你其实模板DNA的量为a, 你PCR循环为x，那么X个循环结束后，你的目标DNA的量为 a * 2^x(这里假设扩增效率是2)

一条引物是线性扩增，模板始终是你加入的DNA模板，而且产物都是单链的，如果还是上述条件，X个循环结束后，你的目标DNA的量为 x*a，且为单链，扩增后的得到的DNA量天壤之别

两条引物扩增和单引物扩增在实际中都有应用
当你做克隆时，你需要双引物扩增，一因为你需要足够量的DNA，二单链的DNA，你克隆不上载体
当在做测序是，就要当引物扩增了