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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白纯化实验用柱子的维护问题？
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简单HE认真

木虫 (小有名气)

[交流] 蛋白纯化实验用柱子的维护问题？

我们蛋白纯化常用的柱子有GST、镍柱，每次用完之后要及时清洗吗？该如何清洗呢？实验时常常没有一个较标准的操作，我想把对柱子的损伤降到最低，请教各位大侠，给点意见，小妹在此谢过啦！
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1楼 2012-10-25 08:49:52
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zoeye

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果是GE的GST柱子 他是有标准的清理程序的 你可以参考 但是要和重生区别开 反复重生柱子的话会对柱子损伤很大

我们纯化NI+的是用的AKTA NI平时用完过完ddH2O(Miliipore) 电导为0后 直接过20%乙醇保存就可以

当年用的GE的4B 记得没错也是保存在20%乙醇里的
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6楼2012-10-26 14:11:15
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linxt2005

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, 鼓励积极交流经验 2012-10-26 08:03:06
简单HE认真: 金币+5 2012-10-29 18:56:00
填料的维护主要是体现在3个方面：
１.层析过程维护：需要注意使用的层析缓冲液的类型，各种试剂，操作压力；
２.使用后的处理：比如层析过程出现沉淀，可以用变性剂进行处理，ＮaOH等，柱子再生，再生方法需要参考说明书；
３.保存：柱子的保存需要在特定的溶液里，比如２０%酒精等。

这些填料的维护方法需要根据母体的成分来确定，比如　sephadex 或者　sepharose　的区别还是挺大的。
至于ＧＳＴ，Ｎi只是作为配基，需要明确这一点先，然后再来讨论，
我觉得最简单的方法就是遵照说明书。
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2楼2012-10-25 12:51:03
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robin_yu

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
根据柱子填料的型号去供应商的网站上下载使用指南，然后遵照指南做就可以了
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3楼2012-10-25 16:31:44
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diandong

禁虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
4楼2012-10-25 17:05:34
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