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简单HE认真

木虫 (小有名气)

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[交流] 蛋白纯化实验用柱子的维护问题？

我们蛋白纯化常用的柱子有GST、镍柱，每次用完之后要及时清洗吗？该如何清洗呢？实验时常常没有一个较标准的操作，我想把对柱子的损伤降到最低，请教各位大侠，给点意见，小妹在此谢过啦！

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1楼2012-10-25 08:49:52

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zoeye

金虫 (小有名气)

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★
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如果是GE的GST柱子他是有标准的清理程序的你可以参考但是要和重生区别开反复重生柱子的话会对柱子损伤很大

我们纯化NI+的是用的AKTA NI平时用完过完ddH2O(Miliipore) 电导为0后直接过20%乙醇保存就可以

当年用的GE的4B 记得没错也是保存在20%乙醇里的

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6楼2012-10-26 14:11:15

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linxt2005

金虫 (小有名气)

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小丹木木: 金币+3, 鼓励积极交流经验 2012-10-26 08:03:06
简单HE认真: 金币+5 2012-10-29 18:56:00

填料的维护主要是体现在3个方面：
１.层析过程维护：需要注意使用的层析缓冲液的类型，各种试剂，操作压力；
２.使用后的处理：比如层析过程出现沉淀，可以用变性剂进行处理，ＮaOH等，柱子再生，再生方法需要参考说明书；
３.保存：柱子的保存需要在特定的溶液里，比如２０%酒精等。

这些填料的维护方法需要根据母体的成分来确定，比如　sephadex 或者　sepharose　的区别还是挺大的。
至于ＧＳＴ，Ｎi只是作为配基，需要明确这一点先，然后再来讨论，
我觉得最简单的方法就是遵照说明书。

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2楼2012-10-25 12:51:03

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