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蛋白纯化实验用柱子的维护问题?
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| 我们蛋白纯化常用的柱子有GST、镍柱,每次用完之后要及时清洗吗?该如何清洗呢?实验时常常没有一个较标准的操作,我想把对柱子的损伤降到最低,请教各位大侠,给点意见,小妹在此谢过啦! |
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3楼2012-10-25 16:31:44
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, 鼓励积极交流经验 2012-10-26 08:03:06
简单HE认真: 金币+5 2012-10-29 18:56:00
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填料的维护主要是体现在3个方面: 1.层析过程维护:需要注意使用的层析缓冲液的类型,各种试剂,操作压力; 2.使用后的处理:比如层析过程出现沉淀,可以用变性剂进行处理,NaOH等,柱子再生,再生方法需要参考说明书; 3.保存:柱子的保存需要在特定的溶液里,比如20%酒精等。 这些填料的维护方法需要根据母体的成分来确定,比如 sephadex 或者 sepharose 的区别还是挺大的。 至于GST,Ni只是作为配基,需要明确这一点先,然后再来讨论, 我觉得最简单的方法就是遵照说明书。 |
2楼2012-10-25 12:51:03
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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4楼2012-10-25 17:05:34
5楼2012-10-25 23:16:03









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