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weining1203

新虫 (小有名气)

[求助] 最近做的菌落pcr,可以做胶回收吗? 已有1人参与

如标题,最近跑的菌落pcr,1-3有拖尾和弥散,但是目的带很亮,产生这种现象的原因是什么啊,杂质比较多吗;4和5的模板是DNA,不是菌落,目的带比较弱,小弟想问一下1-3可不可做胶回收然后连T载体做克隆啊,还要优化pcr条件吗?

eric 2012-09-25 21hr 01min1.jpg
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sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-09-27 13:49:45
菌液的背景不纯因为太多杂质了。如果可以的话提取菌的DNA再去做扩增,可能会好一点。在因为两端直接设计酶切位点就可以了。
如果条带那么强,可以直接割胶回收的。如果懒得重新设计引物,可以看看现成的T载体里有没有你想要的酶切位点,有的话直接连到T载体中再提取质粒双酶切也可以。不过也是挺折腾的~

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

你的日子如何,你的力量也必如何!
16楼2012-09-27 09:29:48
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