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weining1203新虫 (小有名气)
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最近做的菌落pcr，可以做胶回收吗？ 已有1人参与
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如标题，最近跑的菌落pcr，1-3有拖尾和弥散，但是目的带很亮，产生这种现象的原因是什么啊，杂质比较多吗；4和5的模板是DNA，不是菌落，目的带比较弱，小弟想问一下1-3可不可做胶回收然后连T载体做克隆啊，还要优化pcr条件吗？ eric 2012-09-25 21hr 01min1.jpg |
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sxxuan
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【答案】应助回帖
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菌液的背景不纯因为太多杂质了。如果可以的话提取菌的DNA再去做扩增，可能会好一点。在因为两端直接设计酶切位点就可以了。 如果条带那么强，可以直接割胶回收的。如果懒得重新设计引物，可以看看现成的T载体里有没有你想要的酶切位点，有的话直接连到T载体中再提取质粒双酶切也可以。不过也是挺折腾的~ |
weining1203
16楼2012-09-27 09:29:48
wu_shiyong
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2楼2012-09-26 09:44:39
cicelyzh
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
| 菌落PCR杂质多，不建议回收做克隆。做连用不了多少DNA的，回收多了也没用，一般50ul的PCR产物足以。 |
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3楼2012-09-26 09:48:18
weining1203
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4楼2012-09-26 10:11:30
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