应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SYBR荧光定量扩增曲线异常
51/1返回列表
查看: 1326  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

dzxy7678

铁虫 (小有名气)

[求助] SYBR荧光定量扩增曲线异常

扩增曲线从左到右浓度依次降低，5倍稀释，熔解曲线中，有2个峰的是浓度最高的，请问，浓度最高的怎么跑成这样？
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : 1.jpg.bmp
    • 2012-09-14 20:05:10, 1.29 M
  • 附件 2 : 2.bmp
    • 2012-09-14 20:07:14, 1.07 M

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-09-14 20:10:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dzxy7678

铁虫 (小有名气)
谢谢，如何补救呢？
赞一下 回复此楼
3楼2012-09-16 10:05:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
嗯......................
       个人意见，如果系列稀释中最高浓度样品出现扩增不正常的现象，往往是指你样品中有PCR抑制物残留，可能是样品提取中有杂质残存，如果是RNA反转录过程，不正确的RT步骤也会有影响。随着你稀释的过程，抑制物浓度也会被稀释到不影响PCR反应的程度，随后的几个样品扩增也就正常化了~
       如果有说错请其他高手指点，若你之后实验解决了这个问题，也请告知我
赞一下 回复此楼
Let God do with it as He wills
2楼2012-09-15 11:02:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
小丹木木: 金币+5, MolEPI+1, 很久没来了，辛苦 2012-09-17 16:44:39
引用回帖:
3楼: Originally posted by dzxy7678 at 2012-09-16 10:05:49
谢谢，如何补救呢？

嗯................
       补救有几个方法：
       1. 重新提，并注意洗涤步骤，乙醇洗两次左右。如果是RNA的话，分光光度测量时注意260/230比值，不要低于1，低于1的话，盐类杂质太多肯定是干扰PCR进程的。
       2. 做标曲好像是可以把头尾的误差较大的点去掉的，多做几个梯度，以6~7个为宜，若除去原液的其他稀释样品都能成线性，且斜率接近-3.32，就不要原液这个点了，用之后的6个点做标曲，但注意，若中间有点误差太大的话是不能去掉的。必须重做。同时你最后待测样品也一定要落在除掉原点后的6个点的线性范围内。
       个人看法 若有说错请高手指点
赞一下 回复此楼
Let God do with it as He wills
4楼2012-09-16 12:36:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭