24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2097  |  回复: 14

xiao肖

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] 蛋白纯化时目的蛋白没有洗脱下来

各位老师,我现在有个蛋白PI值是5.3,分子量29000,我用DEAE纯化时,缓冲液是10mMPB,pH7.3,用60mMNaCl就可以洗脱下来了,因为实验原因,我现在想改用QFastFlow纯化该蛋白,缓冲液没变,同样的条件,我竟然用1MNaCl都洗不下来,Q填料是新买的,我没有预处理,这种情况会不会是死吸附了呢,如果是死吸附,我是不是用0.5MNaOH处理就可以了呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

冼亮淀粉酶

禁虫

生物大分子降解酶

★ ★
看天: 金币+2, 鼓励交流 常来 2012-08-31 17:29:52
引用回帖:
4楼: Originally posted by 生物-TJAB at 2012-08-26 23:30:17
强弱离子柱!不是因为结合力强弱划分的哦!是根据使用的PH范围划分的!可以用氢氧化钠洗柱子啊!
...

强阴和弱阴都可以在pH7.3时使用,虽说强弱的命名不是因吸附强度差异而来,但事实上是存在差异的。

我没说不能用氢氧化钠洗层析柱
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2012-08-27 00:22:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

冼亮淀粉酶

禁虫

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 专家出马,一个顶两 2012-08-26 04:06:27
虽说Q作为强阴,吸附能力比弱阴DEAE强,但0.06M和1M也差太多了吧。这很违反常理,只能再做一次,什么溶液都控制好,测好蛋白质回收率,说不定就不诡异了。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2012-08-26 01:09:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiehe_ai

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

2楼说的对,还是用NaOH处理下再重复实验吧
夫天地者,万物之逆旅也;光阴者,百代之过客也。而浮生若梦,为欢几何?古人秉烛夜游,良有以也。况阳春召我以烟景,大块假我以文章。
3楼2012-08-26 18:49:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生物-TJAB

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

★ ★ ★
wizardfan: 金币+3, 鼓励新虫发帖交流 2012-08-27 00:02:06
引用回帖:
2楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-08-26 01:09:59
虽说Q作为强阴,吸附能力比弱阴DEAE强,但0.06M和1M也差太多了吧。这很违反常理,只能再做一次,什么溶液都控制好,测好蛋白质回收率,说不定就不诡异了。

强弱离子柱!不是因为结合力强弱划分的哦!是根据使用的PH范围划分的!可以用氢氧化钠洗柱子啊!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2012-08-26 23:30:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

禁虫

生物大分子降解酶

你不用激动到连用4个感叹号
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
6楼2012-08-27 00:24:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

新虫

合伙创业版兼职版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
先检测一下你的蛋白有没有挂上去吧。
7楼2012-08-27 08:11:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioleo

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
看天: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-31 17:30:06
0.5M NaOH洗,更换缓冲液再做。
谁让你用PB的!
强弱离子填料结合力是有不同,但强离子填料结合力一定比弱离子填料强吗?哈哈。
8楼2012-08-28 09:41:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiao肖

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
8楼: Originally posted by bioleo at 2012-08-28 09:41:52
0.5M NaOH洗,更换缓冲液再做。
谁让你用PB的!
强弱离子填料结合力是有不同,但强离子填料结合力一定比弱离子填料强吗?哈哈。

老师,那您觉得什么缓冲液比较合适呢?谢谢
9楼2012-08-29 11:18:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiao肖

超级版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
3楼: Originally posted by xiehe_ai at 2012-08-26 18:49:05
2楼说的对,还是用NaOH处理下再重复实验吧

恩,好的,谢谢
10楼2012-08-29 11:19:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xiao肖 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料0856 英一数二 323 求调剂 +7 袁sy 2026-04-01 7/350 2026-04-01 09:16 by Dyhoer
[考研] 085701环境工程,267求调剂 +17 minht 2026-03-26 17/850 2026-04-01 09:11 by xiayizhi
[考研] 调剂申请 +8 张张张张zy 2026-03-31 9/450 2026-04-01 08:29 by zjbkx
[考研] 307分求调剂 +7 (o~o) 2026-03-31 7/350 2026-04-01 08:20 by JourneyLucky
[考研] 326求调剂 +3 崽崽仔 2026-03-31 3/150 2026-04-01 08:05 by JourneyLucky
[考研] 286分调剂 +11 Faune 2026-03-30 13/650 2026-03-31 17:28 by michael2011
[考研] 329求调剂,一志愿西北工业大学,材料工程(085601) +6 小小机灵虫 2026-03-29 12/600 2026-03-31 16:58 by 记事本2026
[考研] 330分求调剂 +6 qzenlc 2026-03-29 6/300 2026-03-31 16:44 by Wang200018
[考研] 266分,求材料冶金能源化工等调剂 +8 哇呼哼呼哼 2026-03-27 10/500 2026-03-31 13:35 by Huaxue_Wang
[考研] 293分求调剂,外语为俄语 +5 加一一九 2026-03-31 5/250 2026-03-31 09:39 by zhshch
[考研] 285求调剂 +6 AZMK 2026-03-29 9/450 2026-03-30 21:02 by dophin1985
[考研] 085601材料工程找调剂 +17 oatmealR 2026-03-29 18/900 2026-03-30 19:21 by Wang200018
[考研] 310求调剂 +10 争取九点睡 2026-03-30 10/500 2026-03-30 16:45 by ztnimte
[考研] 343求调剂085601 +3 要努力学习x 2026-03-29 3/150 2026-03-29 18:35 by wxiongid
[考研] 本科新能源科学与工程,一志愿华理能动285求调剂 +3 AZMK 2026-03-27 5/250 2026-03-28 16:19 by xxxsssccc
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 314求调剂 +3 溪云珂 2026-03-26 3/150 2026-03-27 11:20 by sanrepian
[考研] 一志愿吉大071010,316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
信息提示
请填处理意见