应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白纯化时目的蛋白没有洗脱下来
151/2返回列表12下一页
查看: 2070  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xiao肖

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白纯化时目的蛋白没有洗脱下来

各位老师，我现在有个蛋白PI值是5.3，分子量29000，我用DEAE纯化时，缓冲液是10mMPB，pH7.3,用60mMNaCl就可以洗脱下来了，因为实验原因，我现在想改用QFastFlow纯化该蛋白，缓冲液没变，同样的条件，我竟然用1MNaCl都洗不下来，Q填料是新买的，我没有预处理，这种情况会不会是死吸附了呢，如果是死吸附，我是不是用0.5MNaOH处理就可以了呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-08-25 23:04:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★
看天: 金币+2, 鼓励交流 常来 2012-08-31 17:29:52
引用回帖:
4楼: Originally posted by 生物-TJAB at 2012-08-26 23:30:17
强弱离子柱！不是因为结合力强弱划分的哦！是根据使用的PH范围划分的！可以用氢氧化钠洗柱子啊！
...

强阴和弱阴都可以在pH7.3时使用，虽说强弱的命名不是因吸附强度差异而来，但事实上是存在差异的。

我没说不能用氢氧化钠洗层析柱
赞一下(1人) 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2012-08-27 00:22:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 专家出马，一个顶两 2012-08-26 04:06:27
虽说Q作为强阴，吸附能力比弱阴DEAE强，但0.06M和1M也差太多了吧。这很违反常理，只能再做一次，什么溶液都控制好，测好蛋白质回收率，说不定就不诡异了。
赞一下 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2012-08-26 01:09:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiehe_ai

金虫 (著名写手)

额
2楼说的对，还是用NaOH处理下再重复实验吧
赞一下 回复此楼
夫天地者,万物之逆旅也；光阴者,百代之过客也。而浮生若梦，为欢几何？古人秉烛夜游，良有以也。况阳春召我以烟景，大块假我以文章。
3楼2012-08-26 18:49:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生物-TJAB

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
wizardfan: 金币+3, 鼓励新虫发帖交流 2012-08-27 00:02:06
引用回帖:
2楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-08-26 01:09:59
虽说Q作为强阴，吸附能力比弱阴DEAE强，但0.06M和1M也差太多了吧。这很违反常理，只能再做一次，什么溶液都控制好，测好蛋白质回收率，说不定就不诡异了。

强弱离子柱！不是因为结合力强弱划分的哦！是根据使用的PH范围划分的！可以用氢氧化钠洗柱子啊！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
4楼2012-08-26 23:30:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
你不用激动到连用4个感叹号
赞一下 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
6楼2012-08-27 00:24:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先检测一下你的蛋白有没有挂上去吧。
赞一下 回复此楼
7楼2012-08-27 08:11:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioleo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
看天: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-31 17:30:06
0.5M NaOH洗，更换缓冲液再做。
谁让你用PB的！
强弱离子填料结合力是有不同，但强离子填料结合力一定比弱离子填料强吗？哈哈。
赞一下 回复此楼
8楼2012-08-28 09:41:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiao肖

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by bioleo at 2012-08-28 09:41:52
0.5M NaOH洗，更换缓冲液再做。
谁让你用PB的！
强弱离子填料结合力是有不同，但强离子填料结合力一定比弱离子填料强吗？哈哈。

老师，那您觉得什么缓冲液比较合适呢？谢谢
赞一下 回复此楼
9楼2012-08-29 11:18:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiao肖

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiehe_ai at 2012-08-26 18:49:05
2楼说的对，还是用NaOH处理下再重复实验吧

恩，好的，谢谢
回复此楼
10楼2012-08-29 11:19:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xiao肖 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +5 ioodiiij 2026-03-17 5/250 2026-03-19 18:22 by zcl123
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +9 一鸭鸭哟 2026-03-14 11/550 2026-03-19 17:22 by ！本暗一次！
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分，一志愿四川大学，诚心求调剂 +5 吃吃吃才有意义 2026-03-19 5/250 2026-03-19 16:18 by 30660438
[考研] 317求调剂 +3 申子申申 2026-03-19 6/300 2026-03-19 14:16 by 申子申申
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-19 3/150 2026-03-19 13:36 by houyaoxu
[考研] 一志愿南昌大学，327分，材料与化工085600 +3 Ncdx123456 2026-03-19 3/150 2026-03-19 13:18 by houyaoxu
[考研] 281求调剂（0805） +9 烟汐忆海 2026-03-16 19/950 2026-03-19 11:42 by laoshidan
[考研] 297求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-17 8/400 2026-03-18 14:30 by laoshidan
[考研] 301求调剂 +9 yy要上岸呀 2026-03-17 9/450 2026-03-18 08:58 by 无际的草原
[考研] 296求调剂 +5 大口吃饭 身体健 2026-03-13 5/250 2026-03-17 21:05 by 不惑可乐
[考研] 268求调剂 +8 一定有学上- 2026-03-14 9/450 2026-03-17 17:47 by laoshidan
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 294求调剂 +3 Zys010410@ 2026-03-13 4/200 2026-03-15 10:59 by zhq0425
[考研] 招收0805（材料）调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] ［0860］321分求调剂，ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭