24小时热门版块排行榜    

查看: 2072  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xiao肖

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白纯化时目的蛋白没有洗脱下来

各位老师,我现在有个蛋白PI值是5.3,分子量29000,我用DEAE纯化时,缓冲液是10mMPB,pH7.3,用60mMNaCl就可以洗脱下来了,因为实验原因,我现在想改用QFastFlow纯化该蛋白,缓冲液没变,同样的条件,我竟然用1MNaCl都洗不下来,Q填料是新买的,我没有预处理,这种情况会不会是死吸附了呢,如果是死吸附,我是不是用0.5MNaOH处理就可以了呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioleo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
看天: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-31 17:30:06
0.5M NaOH洗,更换缓冲液再做。
谁让你用PB的!
强弱离子填料结合力是有不同,但强离子填料结合力一定比弱离子填料强吗?哈哈。
8楼2012-08-28 09:41:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 专家出马,一个顶两 2012-08-26 04:06:27
虽说Q作为强阴,吸附能力比弱阴DEAE强,但0.06M和1M也差太多了吧。这很违反常理,只能再做一次,什么溶液都控制好,测好蛋白质回收率,说不定就不诡异了。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2012-08-26 01:09:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiehe_ai

金虫 (著名写手)

2楼说的对,还是用NaOH处理下再重复实验吧
夫天地者,万物之逆旅也;光阴者,百代之过客也。而浮生若梦,为欢几何?古人秉烛夜游,良有以也。况阳春召我以烟景,大块假我以文章。
3楼2012-08-26 18:49:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生物-TJAB

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
wizardfan: 金币+3, 鼓励新虫发帖交流 2012-08-27 00:02:06
引用回帖:
2楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-08-26 01:09:59
虽说Q作为强阴,吸附能力比弱阴DEAE强,但0.06M和1M也差太多了吧。这很违反常理,只能再做一次,什么溶液都控制好,测好蛋白质回收率,说不定就不诡异了。

强弱离子柱!不是因为结合力强弱划分的哦!是根据使用的PH范围划分的!可以用氢氧化钠洗柱子啊!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2012-08-26 23:30:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856调剂,是学校就去 +6 sllhht 2026-03-19 7/350 2026-03-19 19:50 by 制度的
[考研] 281求调剂(0805) +9 烟汐忆海 2026-03-16 19/950 2026-03-19 11:42 by laoshidan
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 0703化学 305求调剂 +4 FY_yy 2026-03-14 4/200 2026-03-19 05:54 by anny19840123
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
[考研] 一志愿华中科技大学,080502,354分求调剂 +4 守候夕阳CF 2026-03-18 4/200 2026-03-18 22:16 by li123456789.
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +3 xbxudjdn 2026-03-18 3/150 2026-03-18 22:14 by zhq0425
[考研] 085600材料与化工 +5 安全上岸! 2026-03-16 5/250 2026-03-18 15:33 by cmz0325
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 299求调剂 +5 △小透明* 2026-03-17 5/250 2026-03-18 11:49 by 尽舜尧1
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[基金申请] 今年的国基金是打分制吗? 50+3 zhanghaozhu 2026-03-14 3/150 2026-03-16 17:07 by 北京莱茵润色
[考研] 0703一志愿211 285分求调剂 +5 ly3471z 2026-03-13 5/250 2026-03-16 16:16 by 哦哦123
[考研] 求老师收留调剂 +4 jiang姜66 2026-03-14 5/250 2026-03-15 20:11 by Winj1e
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化,一志愿:哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 复试调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
信息提示
请填处理意见