应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白纯化时目的蛋白没有洗脱下来
51/1返回列表
查看: 2057  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xiao肖

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白纯化时目的蛋白没有洗脱下来

各位老师，我现在有个蛋白PI值是5.3，分子量29000，我用DEAE纯化时，缓冲液是10mMPB，pH7.3,用60mMNaCl就可以洗脱下来了，因为实验原因，我现在想改用QFastFlow纯化该蛋白，缓冲液没变，同样的条件，我竟然用1MNaCl都洗不下来，Q填料是新买的，我没有预处理，这种情况会不会是死吸附了呢，如果是死吸附，我是不是用0.5MNaOH处理就可以了呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-08-25 23:04:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生物-TJAB

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
wizardfan: 金币+3, 鼓励新虫发帖交流 2012-08-27 00:02:06
引用回帖:
2楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-08-26 01:09:59
虽说Q作为强阴，吸附能力比弱阴DEAE强，但0.06M和1M也差太多了吧。这很违反常理，只能再做一次，什么溶液都控制好，测好蛋白质回收率，说不定就不诡异了。

强弱离子柱！不是因为结合力强弱划分的哦！是根据使用的PH范围划分的！可以用氢氧化钠洗柱子啊！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
4楼2012-08-26 23:30:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 专家出马，一个顶两 2012-08-26 04:06:27
虽说Q作为强阴，吸附能力比弱阴DEAE强，但0.06M和1M也差太多了吧。这很违反常理，只能再做一次，什么溶液都控制好，测好蛋白质回收率，说不定就不诡异了。
赞一下 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2012-08-26 01:09:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiehe_ai

金虫 (著名写手)

额
2楼说的对，还是用NaOH处理下再重复实验吧
赞一下 回复此楼
夫天地者,万物之逆旅也；光阴者,百代之过客也。而浮生若梦，为欢几何？古人秉烛夜游，良有以也。况阳春召我以烟景，大块假我以文章。
3楼2012-08-26 18:49:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★
看天: 金币+2, 鼓励交流 常来 2012-08-31 17:29:52
引用回帖:
4楼: Originally posted by 生物-TJAB at 2012-08-26 23:30:17
强弱离子柱！不是因为结合力强弱划分的哦！是根据使用的PH范围划分的！可以用氢氧化钠洗柱子啊！
...

强阴和弱阴都可以在pH7.3时使用，虽说强弱的命名不是因吸附强度差异而来，但事实上是存在差异的。

我没说不能用氢氧化钠洗层析柱
赞一下(1人) 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2012-08-27 00:22:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专硕306英一数二 +8 z1z2z3879 2026-03-16 10/500 2026-03-18 00:01 by 星空星月
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +7 yangfz 2026-03-17 7/350 2026-03-17 23:57 by 星空星月
[考研] 303求调剂 +3 睿08 2026-03-17 5/250 2026-03-17 22:01 by 睿08
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +3 困于星晨 2026-03-17 3/150 2026-03-17 14:08 by ms629
[考研] 321求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
[考研] 294求调剂 +3 Zys010410@ 2026-03-13 4/200 2026-03-15 10:59 by zhq0425
[考研] 材料工程327求调剂 +3 xiaohe12w 2026-03-11 3/150 2026-03-14 20:20 by ms629
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] 材料与化工求调剂一志愿 985 总分 295 +8 dream…… 2026-03-12 8/400 2026-03-13 22:17 by 星空星月
[考研] 308求调剂 +5 是Lupa啊 2026-03-11 5/250 2026-03-13 22:13 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 0703化学一志愿211 总分320求调剂 +5 玛卡巴卡啊哈 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:40 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-12 5/250 2026-03-13 15:56 by 棒棒球手
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考研] 283求调剂，材料、化工皆可 +8 苏打水7777 2026-03-11 10/500 2026-03-13 09:06 by Linda Hu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭