应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助，巢式PCR，出了点儿问题，！
51/1返回列表
查看: 2905  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

襄阳蓉儿

新虫 (小有名气)

[交流] 求助，巢式PCR，出了点儿问题，！

第一步pcr都是25微升的体系，12.5微升的premix，上下游引物都是0.5微升，模版是2微升。。。
第二步50微升体系premix，上下游引物1微升，模版2微升
哪里出问题了，难道是我的操作？
师兄做的p出来的条带很亮很好，应该不是引物设计问题吧。
为什么我做的阳性对照有条带而且非常的弱，我的样品啥都没有，郁闷啊！！！图片中阳性对照跑出来两个条带，一条亮的是我的目的条带，目的条带是592bp，弱的不知道是什么。。。


[ Last edited by 襄阳蓉儿 on 2012-7-16 at 20:30 ]
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : UVP00639July162012.tif
    • 2012-07-16 20:17:51, 306.81 K

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-07-15 15:39:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

襄阳蓉儿

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jl860822 at 2012-07-16 08:43:51
我以前也做过巢式PCR，一般很容易出结果的，你肯定是中间出了问题，我建议，你第一步先跑胶看一下，如果第1步啥都没有，那第2步就不好说

我问了师兄也自己查了相关资料，第一步没有条带是正常的吧？
赞一下 回复此楼
5楼2012-07-16 09:15:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

jqzhu1998

铁虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-07-15 19:46:10
是不是写错了？？12.5ul的酶？？
第二步的体系可以放大，做75或100
慢慢来，多看看师兄做的，自己再多琢磨琢磨，细心一点，肯定能做出来的。
赞一下 回复此楼
2楼2012-07-15 16:24:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jl860822

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我以前也做过巢式PCR，一般很容易出结果的，你肯定是中间出了问题，我建议，你第一步先跑胶看一下，如果第1步啥都没有，那第2步就不好说
赞一下 回复此楼
3楼2012-07-16 08:43:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

倾听世界0721

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
第二次可以做到50ul，把引物、dNTP的量增加一倍。
赞一下 回复此楼
6楼2012-07-16 10:20:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学求调剂 +19 不知名的小卅 2026-04-08 19/950 2026-04-09 08:02 by 5268321
[考研] 08工科求调剂290分 +9 1314捧花 2026-04-02 12/600 2026-04-09 03:43 by 孙小小12457
[考研] 287求调剂 +6 Fnhc 2026-04-07 6/300 2026-04-08 10:05 by xingguangj
[考研] 338求调剂 +8 wxygxsaaaaa 2026-04-06 8/400 2026-04-08 06:58 by 无际的草原
[考研] 计算机408｜在校多次国家级竞赛获奖｜申请调剂 +4 东山大白鹅 2026-04-05 4/200 2026-04-08 00:18 by chongya
[考研] 一志愿211电子信息347求调剂 +3 554916 2026-04-03 3/150 2026-04-07 23:22 by 如若时光倒流
[考研] 338求调剂 +5 小猪红色 678 2026-04-06 6/300 2026-04-07 21:18 by 乔哒哒哒
[考研] 生物与医药求调剂 +7 heguanhua 2026-04-05 8/400 2026-04-06 18:41 by macy2011
[考研] 269电子信息求调剂，可转专业 +5 独酌wl 2026-04-06 5/250 2026-04-06 17:23 by 土木硕士招生
[考研] 求调剂到材料 +5 程9915 2026-04-06 5/250 2026-04-06 15:21 by yulian1987
[考研] 0703化学 +9 goldtt 2026-04-02 11/550 2026-04-06 10:35 by 无际的草原
[考研] 材料专硕322分 +10 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-04 10/500 2026-04-05 21:22 by 学员8dgXkO
[考研] 计算机11408，286分求调剂 +7 木子念晞 2026-04-05 7/350 2026-04-05 19:02 by chy09050039
[考研] 08专硕275调剂 +5 AaAa7420 2026-04-05 5/250 2026-04-05 18:01 by jkddd
[考研] 0832食品科学与工程学硕282调剂 +6 鱼在水中游a 2026-04-02 9/450 2026-04-05 11:45 by flysky1234
[考研] 考研调剂 +5 四川王涛 2026-04-04 5/250 2026-04-04 22:18 by 啵啵啵0119
[考研] 321求调剂 +13 认真求上学 2026-04-02 13/650 2026-04-04 18:23 by macy2011
[考研] 考研调剂 +5 小sun要好运 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:43 by 啵啵啵0119
[考研] 0705理学294求调剂 +3 成果成果cg5 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:04 by simons1972
[考研] 22408 266求调剂 +3 masss11222 2026-04-02 3/150 2026-04-02 18:11 by 笔落锦州
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭