24小时热门版块排行榜    

查看: 1384  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yqs129219

新虫 (小有名气)

[求助] 请问各位前辈们,这样的RNA电泳图能用于RT-PCR吗?

上样量是5ul的RNA和1ul的6Xloding Buffer  前面是DNA Marker2000,颜色淡的浓度是不是很低啊

4列为一个样



4列为一个样
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

不知道有没有测OD,参考一下OF260/280。点样孔亮可能有杂质(如蛋白)。抽提不干净或转移上清时吸到中间层的蛋白了。下次注意。
伟大航线....
9楼2012-07-12 08:57:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

shenye.judy

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-07-09 21:03:10
跑RNA时,还是先测量下OD值,然后加入等量的RNA(0.5-0.75ug),而不是加入等体积的,可比性不好。根据现在的图,看RNA完整度的话,还可以,勉强能用RT-PCR。当然如果做基因表达量比较的话,尽量用质量好的,一致的RNA。
2楼2012-07-09 19:46:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yqs129219

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shenye.judy at 2012-07-09 19:46:29
跑RNA时,还是先测量下OD值,然后加入等量的RNA(0.5-0.75ug),而不是加入等体积的,可比性不好。根据现在的图,看RNA完整度的话,还可以,勉强能用RT-PCR。当然如果做基因表达量比较的话,尽量用质量好的,一致的 ...

测OD值也不一定准确的,根据Marker亮度来大致估算RNA浓度。这样可以吧。我是反转录用来做同源克隆的
3楼2012-07-09 20:44:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenye.judy

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-07-10 13:45:50
反转录用来做同源克隆,那就没那么严格了,你可以直接往下做试试。
另外,如果你提取的质量较好,且质量较一致的话,跑出来的条带亮度基本是一致的(等量的RNA)。
4楼2012-07-10 10:40:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 085601专硕,总分342求调剂,地区不限 +4 share_joy 2026-03-16 4/200 2026-03-17 21:32 by hmn_wj
[考研] 268求调剂 +7 好运连绵不绝 2026-03-12 8/400 2026-03-17 20:28 by xilongliang
[考研] 085600材料与化工求调剂 +5 绪幸与子 2026-03-17 5/250 2026-03-17 16:40 by laoshidan
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林,给自己招师弟中~ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[考研] 289求调剂 +6 步川酷紫123 2026-03-11 6/300 2026-03-17 10:23 by Sammy2
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨; 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-03-13 4/200 2026-03-14 08:37 by zhukairuo
[考研] 一志愿中科院,化学方向,295求调剂 +4 一氧二氮 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:35 by JourneyLucky
[考研] 0703,333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学 +3 李魔女斗篷 2026-03-11 3/150 2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +6 步川酷紫123 2026-03-13 6/300 2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:27 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 277求调剂 +4 anchor17 2026-03-12 4/200 2026-03-13 11:15 by 白夜悠长
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
信息提示
请填处理意见