| 查看: 1745 | 回复: 11 | ||
[求助]
克隆目的基因
|
||
|
一直在从一个全基因组不知道的菌种克隆目的基因，最近根据同源性设计了兼并引物。现在遇到了以下这些问题： 1.用兼并引物P目的片段时，使用梯度PCR做的，确定退火温度在58—65之间都有条带，最后回收胶，做连接，转化，蓝白斑筛选，挑了18个白斑进行菌落PCR，发现没有目标条带。（注：因为是新手，切胶回收时切得有些宽，师姐说可能回收率太低） 2.介于上次失败，所以就从头开始做一次克隆，所选的退火温度是62℃。但是这次居然没有P出来。  只有一条很淡的条带，这也没法回收啊。所以请高手指点一下啦。万分感谢。 |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有128人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 新的表达一直诱导不出来
已经有6人回复
- 基因克隆中酶切连接问题
已经有13人回复
- 请问能不能仅克隆单一基因的一小片段
已经有4人回复
- 一个关于水稻基因图位克隆的问题诚挚恳求大牛解答
已经有6人回复
- 已知全长基因怎样克隆并构建表达载体
已经有8人回复
- 有人找公司合成过目的基因吗
已经有3人回复
- 【求助/交流】如何降低，多克隆抗体非特异性？
已经有12人回复
- 【求助/交流】目的基因克隆总不成功
已经有5人回复
- 【求助/交流】只知道基因功能，但不知序列位置，怎样克隆目的基因
已经有8人回复
- 【求助/交流】求助基因克隆方面的问题解决方案
已经有17人回复
- 【求助/交流】关于目的基因的克隆
已经有12人回复
8楼2012-05-28 21:40:08
克隆大虾
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 133 (高中生)
- 金币: 6026.9
- 散金: 236
- 红花: 10
- 帖子: 2367
- 在线: 1337.5小时
- 虫号: 93868
- 注册: 2005-09-15
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2012-05-28 00:45:26
克隆大虾
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 133 (高中生)
- 金币: 6026.9
- 散金: 236
- 红花: 10
- 帖子: 2367
- 在线: 1337.5小时
- 虫号: 93868
- 注册: 2005-09-15
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2012-05-28 00:47:30
4楼2012-05-28 08:16:19
yinchu1990 
铜虫 (小有名气)
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 163.4
- 散金: 677
- 红花: 11
- 帖子: 123
- 在线: 32.1小时
- 虫号: 1505986
- 注册: 2011-11-23
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
5楼2012-05-28 09:01:00
trizol11
木虫 (正式写手)
- 应助: 47 (小学生)
- 金币: 2714.2
- 散金: 199
- 红花: 3
- 帖子: 572
- 在线: 172.8小时
- 虫号: 1711824
- 注册: 2012-03-23
- 性别: GG
- 专业: 兽医药理学与毒理学
6楼2012-05-28 12:51:13
jasonwyb123
金虫 (小有名气)
- MolEPI: 1
- 应助: 59 (初中生)
- 金币: 1229.6
- 红花: 1
- 帖子: 205
- 在线: 29.5小时
- 虫号: 1751129
- 注册: 2012-04-12
- 专业: 蛋白质组学
7楼2012-05-28 14:34:54
trizol11
木虫 (正式写手)
- 应助: 47 (小学生)
- 金币: 2714.2
- 散金: 199
- 红花: 3
- 帖子: 572
- 在线: 172.8小时
- 虫号: 1711824
- 注册: 2012-03-23
- 性别: GG
- 专业: 兽医药理学与毒理学
9楼2012-05-29 12:10:53
10楼2012-05-29 15:52:29
