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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于E-tag标记蛋白的纯化问题！~求助，谢谢帮忙~！
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hchh2002

木虫 (小有名气)

[求助] 关于E-tag标记蛋白的纯化问题！~求助，谢谢帮忙~！

最近做单链抗体（SCFV）的原核表达，用的是PANAB5E载体，表达在E.coil HB2151中，以包涵体的形式存在。现在想把蛋白纯化一下，可是现在有个问题存在：
1，网上查到原来在安马西亚公司的E-tag纯化柱停产了，请问现在还有没什么方法可以纯化SCFV蛋白？这个蛋白是30kd左右。
2，蛋白是以包涵体存在，要复性再纯化还是先纯化后复性？
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1楼 2012-05-21 12:37:41
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jqq1985

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

或者重新克隆一下，带个His标签，8M尿素变性条件下过镍柱，纯的不得了。
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6楼2012-06-16 22:58:37
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hchh2002

木虫 (小有名气)
顶下问题哦~
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2楼2012-05-23 09:50:19
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l68266152

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是否可以考虑做在变性条件下得纯化？
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相信自己
3楼2012-06-14 13:21:07
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肖颖2009

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

一般是变性复性之后再纯化
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4楼2012-06-14 22:50:53
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