24小时热门版块排行榜

返回列表

可帅儿

银虫 (正式写手)

应助: 14 (小学生)
金币: 652.1
帖子: 375
在线: 94.2小时
虫号: 1639660

[交流] 荧光PCR引物和探针稀释问题

想问一下大家平时稀释探针和引物用的是什么？
说明书上写的用TE溶液，但是我们这边没有，师兄说用无菌超纯水稀释就行了。
我心里不太放心，所以想请教一下。用水稀释会不会对引物保存产生不好影响吗？
还有稀释的浓度，说明书上写若是要稀释到10uM，那就得加（nmoles*100）ul的TE，跟着上面做没问题吧？稀释后可以放在振荡器上震荡混匀吗？会不会破坏引物和探针的结构？
十分感谢！本人新手一枚，疑问较多，金币较少，所以多多包涵

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

了解反向PCR、嵌套PCR的虫子们进来看一下吧~ 已经有11人回复
real time PCR模板稀释问题已经有4人回复
合成的引物该怎么处理，用超纯水还是什么稀释？已经有3人回复
荧光探针稀释后能保存多久？已经有8人回复
2个不同的荧光染料探针的针对同一个可检测出的基因，荧光增量会不会有交叉已经有5人回复
荧光分子探针的问题已经有9人回复
双重荧光定量PCR同管反应，其引物和探针的设计需要考虑哪些问题呢？已经有7人回复
荧光定量PCR扩增曲线怎么成这样了呢？为什么? 已经有15人回复
荧光PCR探针特异性不足如何优化？已经有4人回复
荧光定量PCR标准曲线有问题乱飞已经有8人回复
双重荧光定量PCR探针荧光基团该怎么选择？已经有5人回复
荧光定量PCR与巢式PCR能结合吗？主要怕扩增出同源基因。已经有4人回复
大家是怎么稀释引物的已经有7人回复
RT-PCR引物稀释问题，欢迎战友们进来指导！急盼中已经有16人回复
求解：实时荧光定量PCR奇峰已经有18人回复
关于TaqMan探针合成的问题已经有18人回复
一种比较详细的PCR技术已经有10人回复
求解释这pcr是啥问题，帮同学问的^_^ 已经有29人回复
荧光定量PCR cDNA怎么定量啊？已经有12人回复
【图文并茂的资料】引物和探针的设计已经有161人回复
【求助/交流】荧光PCR扩增曲线问题已经有18人回复
【分享】提高PCR特异性的方法已经有10人回复
【分享】荧光定量PCR实验指南（二）已经有12人回复
【分享】荧光定量PCR实验指南（一）已经有20人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2012-03-31 14:56:52

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

atlanticwi

金虫 (正式写手)

MolEPI: 25
应助: 138 (高中生)
金币: 141.2
帖子: 536
在线: 313.2小时
虫号: 1099992

★ ★ ★
可帅儿(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+2, 我们也是用纯水稀释 2012-04-01 18:07:38

嗯...........
稀释的话只用无菌超纯水就行了，TE的话，EDTA可能会有对下游PCR反应产生影响。水稀释没有什么影响，请放心
之后稀释等过程，一切按说明书的流程来办就可以了，不用担心，出了任何问题，他们是要担责任的

赞一下(1人)

回复此楼

2楼2012-03-31 15:35:12

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

普通回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

MolEPI: 25
应助: 138 (高中生)
金币: 141.2
帖子: 536
在线: 313.2小时
虫号: 1099992

忘了一句：探针引物记得避光..........................

赞一下

回复此楼

3楼2012-03-31 15:37:22

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

可帅儿

银虫 (正式写手)

应助: 14 (小学生)
金币: 652.1
帖子: 375
在线: 94.2小时
虫号: 1639660

引用回帖:

2楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-03-31 15:35:12:
嗯...........
稀释的话只用无菌超纯水就行了，TE的话，EDTA可能会有对下游PCR反应产生影响。水稀释没有什么影响，请放心
之后稀释等过程，一切按说明书的流程来办就可以了，不用担心，出了任何问题，他们是要担 ...